天然及氧化修饰高密度脂蛋白对内皮细胞部分分泌功能的影响

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动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生涉及多因素、多环节。其中内皮细胞损伤和功能改变被认为是AS的始动环节。研究表明,天然高密度脂蛋白(HDL)能维持内皮细胞的完整性,有助于血管松弛,减少血小板聚集,这些功能加上其胆固醇逆向转运功能对内皮细胞有明显的保护作用。而近年来本室及国外的研究发现,HDL在体内可以被内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞氧化修饰,体外可以被Cu2+、HClO等氧化修饰。HDL一旦被氧化修饰后,不仅丧失以上功能,而且具有明显的细胞毒作用,从而促进AS的发生。本研究就是在国内外包括本室研究的基础上,探讨天然高密度脂蛋白和氧化修饰高密度脂蛋白对内皮细胞部分分泌功能的影响。 首先分离正常人血浆高密度脂蛋白,用Cu2+法在体外将其氧化修饰后,234nm光吸收值、相对电泳迁移率(REM)和硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)含量均显著增加(p<0.01),表明HDL发生了氧化修饰。然后把不同质量浓度(5mg/L,10mg/L,50mg/L)的氧化修饰高密度脂蛋白(oxidized high density lipoprotein,OX-HDL)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共同孵育24小时,用试剂盒测定细胞培养基中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,再用蛋白含量校正由于各孔细胞数目不一样所带来的误差,以真实反映不同组之间的差别。结果发现,和磷酸
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