目的探讨青黛油制剂的制备方法,检测其活性成分靛玉红含量,建立青黛油制剂质量控制方法。探讨盐酸普萘洛尔致银屑病样皮损模型的造模周期。探讨青黛油治疗银屑病样皮损的疗效与安全性。方法1、将青黛粉与山茶油(1∶5,1∶10)、山茶油与橄榄油的混合油(1∶5∶5)、橄榄油(1∶5,1∶10)按比例混合,高温加热、萃取、过滤,制备青黛油。采用HPLC法分别检测各青黛油制剂中的靛玉红的含量。色谱柱为Kromasil C18柱;流动相为10%N,N-二甲基甲酰胺-甲醇的水溶液;其流速为1 mL/min;检测波长:292 nm。2、制备好造模用药5%的盐酸普萘洛尔搽剂。取豚鼠32只,随机分成正常组(16只)和模型组(16只)。模型组每只豚鼠用盐酸普萘洛尔搽剂涂两侧耳廓皮肤,每日3次,连续5周。2周、3周、4周、5周时,每周分别取正常豚鼠4只和模型组4只豚鼠的两侧耳廓皮肤标本,10%福尔马林固定,HE染色,光镜观察,评价盐酸普萘洛尔致豚鼠耳部皮肤银屑病样皮损模型的质量。3、取健康豚鼠36只,随机分成正常组(8只)和模型组(28只)。选用盐酸普萘洛尔致豚鼠耳部皮肤银屑病样皮损模型,造模时间为3周。造模3周时,取4只正常豚鼠和4只模型组豚鼠,双侧耳廓标本病理检查,评价造模质量。其余模型组豚鼠单侧每8只耳朵设置为1组,分组给药治疗,分别选择青黛橄榄油、青黛山茶油外用组为试药组,橄榄油、山茶油外用组为基质对照组;卡泊三醇搽剂外用组为阳性药组;上述各组均分组用药4周,每天用药2次;与模型自然转归组、正常组进行分组对照研究,观察疗效与不良反应。用药4周后,各组均取双侧耳廓皮肤标本,10%福尔马林固定,HE染色,光镜观察,评价各药对银屑病样皮损模型的作用效果。结果1、靛玉红的含量测定,线性范围1.536~5.376μg/mL(r~2=0.9999),其平均回收率为99.4%,RSD为2.2%。测得青黛山茶油(1∶5)、青黛橄榄油(1∶5)、青黛山茶油(1∶10)、青黛橄榄油(1∶10)和青黛橄榄山茶油(1∶5∶5)中,靛玉红的提取率分别为0.050%、0.086%、0.099%、0.144%、0.106%。2、造模2周出现红斑、鳞屑等典型的银屑病样皮损改变,病理检查出现表皮角化过度、角化不全,棘细胞层增厚,表皮突呈杵状延伸,真皮浅层可见淋巴细胞浸润。造模3周比造模2周银屑病样皮损特征性病理改变更明显,Baker法组织学评分高于造模2周。造模4~5周,出现了皮肤变硬、萎缩、开裂等表现。3、模型治疗后(即分组给药干预4周时),青黛油组(青黛橄榄油组、青黛山茶油组)、卡泊三醇组银屑病样皮损明显减轻,未见明显不良反应,Baker评分明显低于模型自然转归组,差异有统计学意义(P<0.05);基质油组Baker评分稍微低于模型自然转归组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论1、青黛油可通过青黛粉与橄榄油、山茶油按一定比例混合,高温加热萃取,过滤而制备。HPLC法用于检测青黛油中靛玉红的含量,简便、可行,可用于青黛油制剂的质量控制。2、造模2~3周为比较合适的盐酸普萘洛尔致银屑病样皮损模型的造模周期。具体造模时间的选择,宜根据实验需要选定。3、青黛油(青黛橄榄油、青黛山茶油)治疗银屑病样皮损安全、有效,疗效与卡泊三醇相当,值得进一步研究和推广应用。