论文部分内容阅读
胰腺是一个重要的内外分泌混合腺,在维持人体内血糖平衡和食物消化方面发挥重要作用。内分泌胰腺代谢紊乱或出现功能障碍就会导致糖尿病,外分泌胰腺的异常增殖经常伴随着胰腺癌的发生。目前,胰腺发育以及疾病发生的分子调控网络还不清楚,这些分子机制的探索对治疗胰腺相关疾病具有重要意义。MicroRNAs (miRNAs)是一类长约21-23nt左右的非编码小RNA,能够在转录后水平和翻译水平调控基因的表达。大量研究表明,niRNAs在动物发育、新陈代谢和疾病发生过程中都扮演重要角色,但目前尚无miR-26a与胰腺发育及疾病相关的报道。我们利用实时定量RT-PCR的方法分析了miR-26a在小鼠胰腺发育过程中的表达模式；通过生物信息预测和双荧光素酶报告系统对niR-26a的靶基因进行了鉴定；通过半定量RT-PCR对miR-26a调控靶基因的作用方式进行分析；最后,通过CCK-8和细胞划痕损伤试验分析了miR-26a在胰腺β细胞增殖和迁移中的调控作用。结果表明,在小鼠胰腺发育过程中,miR-26a在E15.5的表达水平最低,在E17.5表达水平最高,成体中miR-26a表达水平与E12.5的表达水平相当。生物信息学预测和双荧光素酶报告系统分析发现,糖原合成酶激酶3b (Gsk3b)为miR-26a的直接靶基因；半定量RT-PCR表明,miR-26a不在转录水平上调控Gsk3b基因的表达,而是在蛋白水平上对Gsk3b进行调控。CCK-8试验和细胞划痕损伤试验证明,miR-26a能够促进胰腺β细胞的增殖而对细胞迁移没有影响。综上所述,(?)niR-26a在小鼠胰腺发育过程中差异表达,Gsk3b为(?)niR-26a的靶基因,miR-26a可以促进胰腺β细胞的增殖,此结果为后续研究(?)niR-26a在胰腺及相关疾病中的功能打下基础。