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目的:通过检测肝组织在缺血再灌注后HSP70 mRNA和蛋白的表达及细胞凋亡情况,探讨肝组织对缺血再灌注的反应及HSP70与肝细胞凋亡之间的关系。为选用有效的预处理方法、抑制细胞凋亡、减轻肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)提供理论基础。方法:1、标本采集:术前、手术结束时、术后第一、四、七天各取外周静脉血10ml,离心取上层血清;术中在肝门阻断前、肝门阻断后开放时和手术结束关腹前各取切缘旁肝组织10克,用于石蜡包埋切片。2、实验方法:原位杂交法检测肝组织中HSP70 mRNA的表达;S-P免疫组织化学法检测肝组织中HSP70的表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肝细胞的凋亡情况;ELISA法测定血清中HSP70的表达情况;自动生化分析仪测定肝功能。结果:1、肝门阻断前肝组织HSP70 mRNA在每高倍视野下阳性细胞数为1.90±0.84,肝门开放时为24.4±5.7,关腹前为35.7±5.7,三组阳性细胞数比较差异有统计学意义(P＜0.05),两两比较差异有统计学意义(P＜0.05)。2、肝门阻断前肝组织HSP70在每高倍视野下阳性细胞数为0,肝门开放时为19.8±4.4,关腹前为29.9±6.2;三组阳性细胞数比较差异有统计学意义(P＜0.05),两两比较差异有统计学意义(P＜0.05)。肝门阻断前HSP70灰度差值为0.1609±0.1558,肝门开放时为0.3409±0.3694,关腹前为0.5896±0.1802;三组比较差异有统计学意义(P＜0.05),两两比较差异有统计学意义(P＜0.05)。3、肝门阻断前肝细胞凋亡指数为(11.4±2.4)‰,肝门开放时为(9.8±1.7)‰,关腹前为(8.6±1.6)‰。肝门阻断前肝细胞的凋亡指数高于肝门开放时肝细胞的凋亡指数(P＜0.05)、高于关腹前肝细胞的凋亡指数(P＜0.05),肝门开放时肝细胞的凋亡指数高于关腹前肝细胞的凋亡指数(P＜0.05)。4、术前血清HSP70光密度值为1.61±0.24,手术结束关腹时为1.58±0.21,术后第一天为1.66±0.26,术后第四天为1.74±0.27,术后第7天为1.68±0.24,各时间点的比较差异有统计学意义(P＜0.05)。5、患者肝功能生化分析各组的ALT和AST在各时间点的变化比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:1、在肝组织中几乎无HSP70 mRNA和HSP70的表达,术中肝缺血再灌注后的肝组织中HSP70 mRNA及HSP70均有较高的表达,且呈上升趋势,提示HSP70与HIRI的发生和发展有一定关系。2、肝门阻断开放后肝组织HSP70 mRNA和HSP70的表达增加、肝细胞凋亡指数减少,两者呈负相关。提示HSP70具有一定的抑制细胞凋亡作用。3、HSP70作为一种保护性因素对机体及肝功能的恢复起到一定作用。