大白菜干烧心病苗期鉴定方法和AFLP标记筛选的研究

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大白菜[Brassica campestris L. ssp. pekinensis(Lour.) Olsson]原产于中国,是我国蔬菜栽培中分布最广、种植面积最大的蔬菜作物之一,在东南亚和欧美国家大白菜也有相当大的栽培面积。但是,近年来干烧心病成了危害大白菜生产的主要病害之一。干烧心病主要是由缺钙引起的生理性病害,不同品种间在抗干烧心病特性上表现出明显的差异,因此,选育抗病品种成为防治干烧心病的一种有效方法。传统的抗干烧心病育种方法费时、费力,且准确性不高。随着分子生物技术的发展,利用分子标记技术筛选与大白菜干烧心病抗病性密切相关的分子标记对育种有重大意义。本研究于2009-2010年对不同的大白菜干烧心病鉴定方法进行了研究、比较并以大白菜抗病品系小孢C8和感病品系651A及其构建的F2代群体为材料,利用AFLP分子标记技术进行大白菜干烧心病基因分子标记的研究,获得的结果如下:1通过对不同的干烧心病鉴定方法的比较,结果表明营养液水培法准确率高,症状明显,可有效用于大白菜干烧心病的苗期鉴定。2利用营养液水培法对F2群体进行苗期鉴定,在136个F2单株中,鉴定出53个抗病单株,83个感病单株。3利用AFLP技术结合BSA法,寻找与大白菜干烧心病相关的分子标记。预扩时采用E01/M01组合,选扩时采用E+3/M+3组合,选用EcoRI引物15条,MseI引物14条,相互组合共计210对引物对抗病亲本小孢C8、感病亲本651A、抗病池(BR)以及感病池(BS)进行扩增,筛选出在抗病池、感病池和双亲间稳定表现多态的引物组合一对:E-AGA/M-CAG,并将该多态性条带命名为E10/M05。4将该多态性条带在F2群体中进行验证,在136个F2单株中,E10/M05标记与干烧心病病情指数的相关系数为0.633(r=0.633>r0.01=0.228),达到极显著相关。5将该差异条带进行测序,在NCBI数据库中进行BLAST比对,没有搜索到同源序列。
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