论文部分内容阅读
本试验以中药槐角为原料,分别采用微波辅助法、超声辅助法及亚临界水法三种方法提取槐角异黄酮,并对三种提取方法进行了比较。然后运用柱层析法对槐角异黄酮提取液进行纯化。选用HPD-300大孔树脂作为柱层析的吸附剂。再用盐酸溶液将初步纯化的槐角异黄酮在一定条件下水解,使其水解为染料木黄酮。最后用HPD-300大孔树脂纯化水解后的槐角异黄酮,得到纯度为90.43%的染料木黄酮。采用微波辅助法提取槐角中的异黄酮,通过单因素及五因素四水平正交试验确定工艺条件为乙醇浓度为60%、微波时间为7 min、微波功率为500 w、提取温度为60℃、液固比为12.5 mL/g,所得槐角异黄酮的得率为77.0 mg/g。采用超声辅助法提取槐角中的异黄酮,通过单因素及五因素四水平正交试验确定的工艺条件为乙醇浓度为80%、超声时间为40 min、超声功率为200 w、超声温度为60℃、液固比为20 mL/g,所得槐角异黄酮的得率为156.3 mg/g。采用亚临界水法提取槐角中的异黄酮,通过单因素及三因素三水平正交试验确定工艺条件为提取温度为130℃、液固比为12.5 mL/g、提取时间45 min,所得的槐角异黄酮的得率为232.8 mg/g。比较了微波辅助法、超声辅助法及亚临界水法三种提取槐角异黄酮的方法。结果显示:亚临界水法提取槐角异黄酮的得率明显高于超声辅助提取及微波辅助提取。采用柱层析法纯化槐角异黄酮,试验确定的工艺条件为选用HPD-300大孔树脂,在25℃条件下,以1 mL/min的流速使浓度为1.5 mg/mL的槐角异黄酮溶液上柱吸附8 h。当上样量为1BV时,采用3BV的85%的乙醇溶液在65℃的条件下以1 mL/min的流速进行洗脱,此时槐角异黄酮的洗脱率为82.6%。经HPD-300大孔树脂纯化后槐角异黄酮的纯度由原来的36.78%提高到76.84%。采用盐酸溶液水解初步纯化的槐角异黄酮,通过单因素及正交试验确定水解的工艺条件为盐酸浓度为1.5 mol/L、水解时间为3 h、水解温度为60℃,运用高效液相色谱法测得在此最优条件下槐角异黄酮的水解率达到98.93%。将水解后得到的染料木黄酮粗产品用HPD-300大孔树脂进行二次纯化,并将纯化后的样品用无水乙醚萃取两次,再用无水乙醇重结晶,然后运用高效液相色谱法测定其浓度,得到纯度为90.43%的染料木黄酮。