本文从以下几个方面进行论述：　　第一部分 ONC后RGC亚型BD细胞的树突变化　　目的:观察ONC后视网膜神经节细胞层细胞的死亡情况、残存BD细胞的树突变化情况，为了解ONC后神经节细胞死亡及功能变化的过程提供依据。　　方法:将10只BD转基因小鼠(FSTL4-CreER:Thy1-Stop-GFP)随机分成ONC后4天组和ONC后7天组，均饲养于相同环境中。为使BD细胞特异性的表达GFP，在BD小鼠14天日龄(P14)时，腹腔注射它莫昔芬150mg/kg。ONC模型的建立:BD小鼠（8-12周）异氟烷气体吸入麻醉及眼表面麻醉后，在手术显微镜下，剪开眼外侧皮肤暴露出外侧眼球。钝性分离并暴露视神经，在球后1.5-2mm处用反向镊夹持视神经10秒，注意避免损伤ON下眼部血管。眼底镜检查确认视网膜血管的血流状态。不需缝合结膜切口，术毕涂氧氟沙星眼膏。均选择左眼为模型眼，右眼为正常对照。分别取ONC后4天和7天小鼠视网膜做全铺片免疫荧光染色，对视网膜GCL层DAPI染色细胞进行计数，选取单个存在的不受其他细胞树突干扰的表达GFP的BD细胞，用Neurolucida软件进行树突重构分析其树突形态。　　结果:在ONC后7天视网膜GCL层细胞数量明显减少(P＜0.01)，并且随时间延长差异越明显。非极性BD细胞和极性BD细胞两者细胞树突面积及树突长度没有明显差异，在ONC损伤后4天和7天非极性BD细胞树突棘数量分别下降了53％(P＜0.001)和86％(P＜0.0001)，而树突面积、树突总长度、树突分枝和树突末梢数量则没有明显变化。对于极性BD细胞来说，ONC损伤后4天时，树突形态虽有改变，但是差异不具有统计学意义，在ONC损伤后7天，树突面积、树突总长度、树突分枝数量和末梢数量与正常对照组相比，分别下降31％(P＜0.01)、34％(P＜0.01)、45％(P＜0.05)和45％(P＜0.05)，树突棘数量在ONC损伤后4天和7天分别下降44％(P＜0.01)和88％(P＜0.001)。　　结论:ONC后会导致视网膜神经节细胞层的细胞数明显减少，极性BD细胞较非极性BD细胞对ONC损伤的反应会更敏感。在ONC后会出现明显的神经元之间的突触联系减少，感受野减小，表明其细胞功能逐渐下降。以上损伤随时间延长而逐渐加重。　　第二部分 ONC损伤后无长突细胞亚型ChAT细胞的变化　　目的:探讨ONC模型导致的小鼠RGC死亡是否会对ChAT细胞(SACs/DSACs)的树突结构产生影响。　　方法:将10只ChAT转基因小鼠(ChAT-CreER:Thy1-Stop-GFP)随机分成ONC后7天组和ONC后10天组，均饲养于相同环境中。为使ChAT细胞特异性的表达GFP，在ChAT小鼠14天日龄(P14)时，腹腔注射它莫昔芬150mg/kg。ONC模型的建立:ChAT小鼠（8-12周）异氟烷气体吸入麻醉及眼表面麻醉后，在手术显微镜下，剪开眼外侧皮肤暴露出外侧眼球。钝性分离并暴露视神经，在球后1.5-2mm处用反向镊夹持视神经10秒，注意避免损伤ON下眼部血管。眼底镜检查确认视网膜血管的血流状态。不需缝合结膜切口，术毕涂氧氟沙星眼膏。均选择左眼为模型眼，右眼为正常对照。　　结果:两种ChAT细胞(SACs/DSACs)分别分布于视网膜GCL和INL层，在ONC损伤后，SACs/DSACs细胞密度没有明显变化。SACs的树突面积比DSACs大，树突也更长。在ONC损伤后，SACs的树突面积在ONC后虽然有所变化，但是差异不具有统计学意义，其树突长度在ONC后7天和10天分别下降了21％和24％，差异具有统计学意义(P＜0.0001)。对于DSACs来说，在ONC后树突面积虽然有所变化，但是差异不具有统计学意义，而树突长度在ONC后7天和10天分别下降了17％和20％，差异具有统计学意义(P＜0.01)。　　结论:1.ONC所造成的视神经损伤，不会使SACs/DSACs发生死亡导致数量下降。2.在ONC后SACs/DSACs树突密度出现下降，可能是RGCs死亡后的突触逆向变性的结果。　　第三部分 CD3基因敲除对BD细胞树突发育的影响及对ONC后BD细胞树突变化的影响　　目的:探讨CD3基因敲除是否对BD细胞的发育存在影响，以及CD3基因敲除是否会影响BD细胞对ONC损伤的反应敏感性。　　方法:将BD转基因小鼠（FSTL4-CreER:Thy1-Stop-GFP）与CD3-/-转基因小鼠进行交配，得到CD3-/-BD转基因小鼠(FSTL4-CreER:Thy1-Stop-GFP:CD3-/-)。将CD3-/-BD小鼠随机分为ONC后4天组和ONC后7天组。每组各5只小鼠，均饲养于相同环境中。均将右眼作为正常对照。为使BD细胞特异性的表达GFP，在BD小鼠14天日龄(P14)时，腹腔注射它莫昔芬150mg/kg。ONC模型的建立:CD3-/-BD小鼠（8-12周）异氟烷气体吸入麻醉及眼表面麻醉后，在手术显微镜下，剪开眼外侧皮肤暴露出外侧眼球。钝性分离并暴露视神经，在球后1.5-2mm处用反向镊夹持视神经10秒，注意避免损伤ON下眼部血管。眼底镜检查确认视网膜血管的血流状态。不需缝合结膜切口，术毕涂氧氟沙星眼膏。均选择左眼为模型眼，右眼为正常对照。　　结果:在CD3基因敲除后，小鼠视网膜GCL层细胞密度没有明显的变化，在ONC损伤后7天，CD3-/-BD小鼠视网膜GCL层细胞数量下降了20％(p＜0.001)，差异具有统计学意义。非极性BD细胞在CD3基因敲除后树突面积下降了23％，树突总长度下降了8％，树突棘数量增加了38％，但是差异并没有统计学意义，而树突分枝和树突末梢均增加了25％(P＜0.05)，差异具有统计学意义。极性BD细胞在CD3基因敲除后树突面积、树突总长度、树突棘、树突分枝和树突末梢虽然有所变化，但是差异均不具有统计学意义。在ONC损伤后，CD3-/-非极性BD细胞的树突面积在ONC7天后下降了11％，但是不具有统计学意义;树突总长度、树突棘数量、树突分枝和树突末梢数量均出现不同程度的下降，并且随着损伤时间延长越明显，差异均具有统计学意义。CD3-/-极性BD细胞树突面积在ONC损伤后4天和7天分别下降了10％和18％，但是差异不具有统计学意义，树突总长度在损伤后明显下降，在ONC损伤后7天下降了30％(P＜0.05)，树突棘、树突分枝和树突末梢在ONC损伤后均明显下降，并且随着损伤时间延长越明显，差异均具有统计学意义。　　结论:1.CD3分子对RGCs的树突发育和细胞分化起着调节作用，CD3基因敲除后，非极性BD细胞树突分枝和末梢数量增加;2.CD3基因敲除不会影响ONC造成的RGCs的损伤和树突结构的重构。　　第四部分 CD3基因敲除对ChAT细胞发育的影响及对ONC后ChAT细胞树突变化的影响　　目的:探讨CD3基因敲除是否对ChAT细胞的发育存在影响，以及CD3基因敲除是否会影响ChAT细胞对ONC损伤的反应敏感性。　　方法:将ChAT转基因小鼠（ChAT-CreER:Thy1-Stop-GFP）与CD3-/-转基因小鼠进行交配，得到CD3-/-ChAT转基因小鼠(ChAT-CreER:Thy1-Stop-GFP:CD3-/-)。将CD3-/-ChAT小鼠随机分成ONC后7天组和ONC后10天组，均饲养于相同环境中。为使ChAT细胞特异性的表达GFP，在ChAT小鼠14天日龄(P14)时，腹腔注射它莫昔芬150mg/kg。ONC模型的建立:CD3-/-ChAT小鼠（8-12周）异氟烷气体吸入麻醉及眼表面麻醉后，在手术显微镜下，剪开眼外侧皮肤暴露出外侧眼球。钝性分离并暴露视神经，在球后1.5-2mm处用反向镊夹持视神经10秒，注意避免损伤ON下眼部血管。眼底镜检查确认视网膜血管的血流状态。不需缝合结膜切口，术毕涂氧氟沙星眼膏。均选择左眼为模型眼，右眼为正常对照。CD3-/-ChAT小鼠ONC后7天和10天视网膜做全铺片免疫荧光染色和冰冻切片免疫荧光染色，对视网膜ChAT细胞进行计数，选取单个存在的不受其他细胞树突干扰的表达GFP的ChAT细胞，用Neurolucida软件进行树突重构分析其树突形态。　　结果:在CD3基因敲除后，SACs细胞平均密度增加了16％(P＜0.01)，而DSACs细胞的数量则没有明显变化。SACs/DSACs在CD3基因敲除后与正常小鼠一样，受到ONC损伤后细胞密度没有明显变化。SACs在CD3基因敲除后树突面积没有发生明显变化，但是树突长度减少了9％(P＜0.01)，DSACs树突面积在CD3基因敲除后增加了37％(P＜0.05)，树突长度增加了6％，但是差异不具有统计学意义。CD3-/-ChAT小鼠的SACs树突面积在ONC后7天及10天与正常对照组相比差异不具有统计学意义，而树突长度来说在ONC后7天和10天分别下降了7％和14％(P＜0.01)。CD3-/-ChAT小鼠的DSACs的树突面积在ONC后7天和10天分别下降了2％和19％，但是差异不具有统计学意义。　　结论:1.CD3分子对SACs/DSACs的树突发育和细胞分化起着调节作用，CD3基因敲除后，SACs细胞密度增加但树突长度下降。2.CD3基因敲除不会影响ONC造成的ChAT细胞的损伤和树突结构的重构。