【摘 要】
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氧化应激是引起衰老以及众多疾病的重要原因,脑缺血、心肌缺血、阿兹海默症和糖尿病等疾病都与氧化应激息息相关。目前,提前检测和预防氧化应激损伤是延缓衰老和减缓病理变化的重要策略。因此,寻找一种无创检测细胞和组织氧化应激水平的方法,具有重要的理论价值和临床意义。细胞模型对于研究氧化应激损伤和抗氧化机制具有重要价值。目前,检测细胞内氧化应激水平的方法主要包括以下两种:非侵入性方法需要利用二氯荧光素（DCF
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氧化应激是引起衰老以及众多疾病的重要原因,脑缺血、心肌缺血、阿兹海默症和糖尿病等疾病都与氧化应激息息相关。目前,提前检测和预防氧化应激损伤是延缓衰老和减缓病理变化的重要策略。因此,寻找一种无创检测细胞和组织氧化应激水平的方法,具有重要的理论价值和临床意义。细胞模型对于研究氧化应激损伤和抗氧化机制具有重要价值。目前,检测细胞内氧化应激水平的方法主要包括以下两种:非侵入性方法需要利用二氯荧光素（DCF）或二氢乙锭（DHE）等荧光探针,而其他检测方法需要以细胞裂解为前提。目前还没有一种无创评估和预测细胞氧化应激水平的方法。在本次研究中,我们检验了我们的假说,即细胞的绿色自发荧光（AF）的强度可以用于无创评估氧化应激诱导的细胞能量代谢损伤以及无创预测细胞的氧化应激损伤。我们的研究发现,双氧水处理能够剂量依赖性地增加HACAT细胞（人角质形成细胞）的绿色自发荧光,该荧光位于细胞核外的区域,然而双氧水无法增加其他类型如PC12细胞和BV2细胞的自发荧光。此外,我们进一步探究发现,双氧水处理后1小时HACAT细胞绿色自发荧光的增加与此时HACAT细胞的ATP水平、线粒体膜电位水平以及细胞内的NAD+水平呈现出高度负相关,并且该自发荧光的增加与双氧水处理后18小时的早期细胞凋亡、晚期细胞凋亡和细胞坏死的增加也呈现出高度相关性。综上所述,我们的研究表明,绿色自发荧光的强度可能成为无创评估和预测HACAT细胞氧化应激损伤的标志物。与传统方法相比,我们的方法具有无创、高效以及低成本等显著优点。
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