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目的：口腔鳞癌(Oralsquamouscellcarcinoma，OSCC)是口腔最常见的恶性肿瘤，严重危害人类健康，但其发生、发展的机制尚不清楚。同其它肿瘤一样，口腔鳞癌的发生、发展是一个多阶段、多步骤渐进演化的过程。已有的研究表明许多癌基因的激活及抑癌基因的失活参与了这一过程。PTEN(phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosome10)基因是1997年发现的一种新的肿瘤抑制基因，其功能十分复杂，具有参与胚胎正常发育，诱导细胞凋亡，引起G1期细胞阻滞，抑制细胞迁移，铺展和局部粘附功能，在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用。新生血管可为肿瘤提供营养物质，刺激肿瘤的生长，同时也是肿瘤播散转移的前提，因此肿瘤血管的生成是肿瘤发生、发展的重要条件。在口腔鳞癌中PTEN能否通过调节血管的生成来抑制肿瘤，尚不十分明确。本实验主要通过对口腔鳞癌组织中PTEN蛋白和微血管密度(microvesseldensity,MVD)的检测，旨在从蛋白质水平探讨抑癌基因PTEN及MVD与口腔鳞癌发生和发展的关系及其作用机理，并进一步分析二者之间的相关性，为口腔鳞癌的预防和治疗提供新的方法；同时探讨组织芯片在肿瘤研究中应用的可行性。
方法：收集口腔鳞癌及相关组织手术切除标本和相应的临床病理资料，分为五组：正常口腔粘膜上皮10例；口腔上皮单纯性增生10例；口腔粘膜白斑15例(伴轻度不典型增生的7例、中度不典型增生的5例、重度不典型增生的3例)；口腔鳞癌72例(伴有淋巴结转移的原发灶37例、不伴有淋巴结转移的原发灶35例)；淋巴结转移灶37例。通过构建组织芯片(tissuechips)结合免疫组织化学链霉菌抗生物素-过氧化物酶染色法(streptavidinproxidoseimmunohistochemistrymethod，SP法)检测正常口腔粘膜上皮、口腔上皮单纯性增生、口腔粘膜白斑和口腔鳞癌组织及相应的淋巴结转移灶中PTEN蛋白和微血管密度(用CD34标记)的表达情况，同时分析PTEN和MVD与临床病理参数的关系，并分析PTEN与MVD的相关性。结果用SPSS11.5forwindows统计软件包进行分析。PTEN蛋白阳性表达率的比较采用X2检验；MVD用(-x)±s表示并采用t检验分析；相关性分析采用Spearmans等级相关分析法分析，口腔鳞癌与淋巴结转移灶中PTEN的表达强度的比较采用配对样本比较的Wilcoxon符号秩检验，以P＜0.05作为差异有显著性的标准。
结果：(1)组织芯片蜡块蜡质细腻均匀，无开裂现象，除一点略有移位外，可见163点整齐排列。切片经染色后无脱片和扭曲，符合观察的需要。(2)PTEN阳性部位在细胞核，呈黄色、棕黄色、黄褐色颗粒，其在正常口腔粘膜、口腔上皮单纯性增生、口腔粘膜白斑(伴轻、中、中度不典型增生)、无淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶、有淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达率分别为100％(10/10)、100％(10/10)、93.33％(14/15)、85.71％(30/35)、59.46％(22/37)、35.14％(13/37)。很明显，从正常口腔粘膜→口腔粘膜癌前病变→无转移的口腔鳞癌→有转移的口腔鳞癌→淋巴结转移灶中，PTEN基因的表达呈逐渐降低趋势。正常口腔粘膜组与口腔粘膜癌前病变组比较，PTEN基因的表达无统计学意义(X2=1.373，P=0.241＞0.05)；口腔粘膜癌前病变组与无淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶比较，PTEN基因的表达也无统计学意义(X2=0.577，P=0.447＞0.05)；但口腔粘膜癌前病变组与有淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶比较，PTEN基因的表达差异有统计学意义(X2=5.749，P=0.016＜0.05)；有淋巴结转移的原发灶比无淋巴结转移的原发灶中PTEN基因的表达率明显降低(X2=6.180，P=0.013＜0.05)，而在淋巴结转移灶中的表达率又比相应的原发灶中的表达率进一步降低(X2=4.391，P=0.036＜0.05)。PTEN的阳性表达率在不同性别、年龄、病程、肿块大小、癌组织浸润深度和pTNM分期等临床病理参数间无统计学意义(P＞0.05)；但与口腔鳞癌的组织分化程度有统计学意义(X2=17.214，P=0.000＜0.05)。(3)在正常口腔粘膜、口腔上皮单纯性增生和口腔粘膜白斑组织中MVD值分别为46.50±3.81、47.30±5.29和49.27±3.15，在口腔鳞癌组织中MVD值为66.14±4.31，差异有统计学意义(t=21.50，P=0.000＜0.05)。很明显，从正常口腔粘膜→口腔粘膜癌前病变→口腔鳞癌，MVD值呈逐渐增高趋势；有淋巴结转移组MVD值为67.62±4.03，无淋巴结转移组MVD值为65.06±4.01，两者间的差异有统计学意义(t=-2.704，P=0.009＜0.05)。MVD值与性别、年龄、病程、肿块大小、癌组织浸润深度和pTNM分期等临床病理参数间差异无统计学意义(P＞0.05)；(4)PTEN阳性组MVD值为65.69±4.09，显著低于PTEN阴性组的MVD值68.15±4.04，二者之间差异有统计学意义(t=-2.291，P=0.025＜0.05)。经Spearmans相关性分析，PTEN与MVD二者呈负相关，差异有统计学意义(rs=-0.371，P=0.001＜0.05)。
结论：(1)组织芯片具有高通量、高效率、节省试剂和时间等优点，并且使各组织的实验条件相同，减少了实验误差，在大样本研究中具有明显的优势。(2)PTEN蛋白在正常口腔粘膜、口腔上皮单纯增生、口腔粘膜白斑组织中呈强阳性表达，在口腔鳞癌组织中表达减低，提示PTEN可能在口腔鳞癌的发生发展中起着重要作用，并可能是口腔鳞癌组织细胞恶性转化的原因之一。(3)PTEN蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小等临床病理参数无相关性，但与口腔鳞癌的组织分化程度和有无淋巴结转移有关，提示PTEN有可能作为口腔鳞癌分级和临床判断患者预后的新的预示指标。(4)MVD值在口腔鳞癌组织中明显高于正常口腔粘膜、口腔上皮单纯增生和口腔粘膜白斑，说明微血管的生成有利于肿瘤的生长；MVD值与口腔鳞癌的病理分级、临床分期等无关，但与淋巴结转移有关，提示微血管的增多，有利于肿瘤的浸润和转移。(5)PTEN与MVD呈负相关，说明PTEN可能通过调控血管的生成来抑制肿瘤的生长。