【摘 要】
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目的:检测miR-155在肝癌标本及细胞系中的表达情况,探讨miR-155在肝癌发生发展过程中的生物学功能,并探究其与肝癌侵袭转移的关系,为肝癌的诊治及预后判断提供新的策略。 方法
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目的:检测miR-155在肝癌标本及细胞系中的表达情况,探讨miR-155在肝癌发生发展过程中的生物学功能,并探究其与肝癌侵袭转移的关系,为肝癌的诊治及预后判断提供新的策略。 方法:1、用人肝癌细胞HepG2和HuH7和正常肝细胞HL-7702,并收集30例原发性肝癌癌组织标本,癌旁组织,12例正常肝组织标本,运用qRT-PCR技术检测miR-155在肝癌组及正常对照组中的表达。2、由慢病毒介导将基因miR-155转染至miR-155表达量低的细胞株(HuH-7)中,将抑制剂 inhibitor(miR-155 inhibitor)转染至表达量高的细胞株(HepG2)中,通过MTT检测细胞增殖,流式细胞仪技术检测转染后细胞周期变化,以及应用划痕愈合试验、Transwell试验了解其对细胞迁移、侵袭的影响。3、通过qRT-PCR技术检测上皮间质转化(EMT)表型相关因子基因的表达及Western blot检测相关蛋白的表达,分析miR-155与EMT的关系。4、通过qRT-PCR分析miR-155与肿瘤大小及有无远处转移的关系,了解其对原发性肝癌发生、发展及预后的影响。 结果:1、miR-155在肝癌细胞系中的表达明显高于对照组,其中HepG2细胞株表达量较高,HuH7细胞株表达量较低,miR-155在肝癌组织中的表达量明显高于癌旁组织和正常组织(P<0.05)。2、HuH7细胞株在转染miR-155后细胞增殖和细胞周期变化不明显,细胞的迁移及侵袭能力增强,转染miR-155 inhibitor至HepG2细胞株后,细胞增殖和细胞周期变化也不明显,而细胞的迁移及侵袭能力减弱。3、HuH7细胞株在转染miR-155后上皮表型CDH1的mRNA及蛋白表达减少,而间质表型snai1和zeb1的mRNA及蛋白表达增加。HepG2细胞株在转染miR-155 inhibitor后,呈现出相反的结果。4、临床统计分析miR-155与肝癌的大小无关,与有无远处转移明显相关。 结论:本实验表明 miR-155在肝癌细胞中呈高表达,并能够通过促进EMT增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力,进而提高肝癌的转移作用。因此,miR-155可成为监测肝癌预后的一个新的指标。
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