【摘 要】
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目的:口腔扁平苔藓（Oral lichen planus,OLP）是一种T细胞介导的自身免疫性疾病,其具体发病机制目前仍不明确,微小RNA（microRNAs,miRNAs）失调参与了多种自身免疫性疾病的发病过程,本研究通过高通量测序技术筛选OLP患者和正常人口腔黏膜组织中差异表达的miRNAs,然后从中选择差异显著且丰度高的3个miRNAs进行血清学验证,探讨miRNAs在OLP发病过程中可能发
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目的:口腔扁平苔藓（Oral lichen planus,OLP）是一种T细胞介导的自身免疫性疾病,其具体发病机制目前仍不明确,微小RNA（microRNAs,miRNAs）失调参与了多种自身免疫性疾病的发病过程,本研究通过高通量测序技术筛选OLP患者和正常人口腔黏膜组织中差异表达的miRNAs,然后从中选择差异显著且丰度高的3个miRNAs进行血清学验证,探讨miRNAs在OLP发病过程中可能发挥的作用,寻找诊断OLP的潜在血清标志物。方法:1、收集3例就诊于河北医科大学第四医院口腔科的OLP患者病变组织（P组）和3例正常口腔黏膜组织（N组）,进行illumina高通量测序,筛选差异表达的miRNAs。2、利用Miranda和Target scan两个数据库对差异显著且表达丰度较高的6个miRNAs进行靶基因预测和功能富集分析。3、选取2020年8月-2021年8月就诊于河北医科大学第四医院口腔科的OLP患者（实验组）30例和健康志愿者（对照组）20例作为研究对象,采用实时荧光定量PCR法测定血清中miR-142-3p、miR-146a-5p、miR-150-5p表达水平,比较三者在两组间的表达差异;再将实验组分为糜烂组（20例）和非糜烂组（10例）,比较三组间的表达差异。4、Pearson相关性系数分析miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p表达的相关性,ROC曲线分析三者对OLP的诊断价值。结果:1、应用DESeq软件,筛选出P组与N组间差异表达的miRNAs共61个,相对于正常口腔黏膜,OLP组织中表达上调的23个,下调的38个。2、选择上调（miR-150-5p、miR-1293、miR-31-3p）和下调（miR-133b、miR-1-3p和miR-206）的miRNAs各3个进行靶基因预测,对这些靶基因进行生物信息学分析,GO分析显示这些靶基因与细胞膜成分的合成有关,参与调节细胞运动、迁移、通讯等生物学过程。KEGG分析显示这些靶基因主要富集在FoxO、TGF-β、磷脂酰肌醇、钙等多种信号通路上。3、与测序结果一致,实验组血清中miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p的表达均高于对照组（P＜0.05）;miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p在正常组、非糜烂组、糜烂组中的表达水平呈现递增趋势,三者在正常组与糜烂组的表达水平差异有统计学意义（P＜0.05）,但非糜烂组与糜烂组的表达差异无统计学意义（P＞0.05）;miR-146a-5p和miR-150-5p的表达在正常组与非糜烂组之间存在统计学差异（P＜0.05）,而miR-142-3p的表达在这两组间无统计学差异（P＞0.05）。4、Pearson分析显示血清中miR-142-3p和miR-146a-5p、miR-146a-5p和miR-150-5p、miR-142-3p和miR-150-5p的表达呈极强正相关（相关系数r分别为0.865、0.822和0.875,且P值均＜0.001）。ROC曲线分析显示,血清miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p独立诊断OLP的ROC曲线下工作面积（AUC）分别为0.711、0.818和0.767,三者联合诊断OLP的AUC为0.834。结论:1、OLP和正常口腔黏膜之间存在差异表达的miRNAs,6种miRNAs（miR-150-5p、miR-1293、miR-31-3p、miR-133b、miR-1-3p和miR-206）可能通过调控靶基因作用于FoxO、TGF-β、磷脂酰肌醇等信号通路,参与了OLP的发病过程。2、miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p的表达与OLP的严重程度存在一定的关系,可能参与了糜烂的发生。3、血清中miR-142-3p、miR-146a-5p和miR-150-5p的表达对OLP有一定的诊断价值,可作为诊断OLP的潜在血清标记物。
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