本文从以下三部分进行了论述：　　 第一部分　　 目的：探讨甘草抗肿瘤活性成分(GC-5)体外对人宫颈癌Hela、人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用，并分析GC-5在诱导凋亡过程中对相关蛋白表达的调控作用，初探抗肿瘤作用机制，为从甘草中开发研制出高效低毒的抗肿瘤有效成分，并应用于临床治疗提供科学依据。　　 方法：　　 1.通过水提取、醇沉、大孔吸附树脂柱层析、制备型薄层层析，分离、提取甘草抗肿瘤活性成分(GC-5)，并通过Acquity超高效液相色谱仪串联四级杆飞行时间质谱仪(UPLC/Q-TOF MS)等进行成分鉴定。　　 2.MTT比色法观察GC-5对Hela、SGC-7901细胞增殖的抑制情况。　　 3.AO/EB双荧光染色法、透射电镜观察细胞凋亡的形态学变化。　　 4.琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞特征性DNA条带。　　 5.流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率。　　 6.Western Blot测定GC-5(25μg/ml)不同时间作用于Hela、SGC-7901细胞，以及不同浓度GC-5作用于Hela细胞24h、SGC-7901细胞12h后，各组细胞中凋亡相关蛋白的表达水平。　　 结果：　　 1.用肿瘤细胞增殖抑制作用为导向的化学分离方法，从甘草中分离提取到甘草抗肿瘤活性成分(GC-5)，其由甘草香豆酮(Licocoumarione)、甘草吡喃香豆素(Licopyranocoumarin)、甘草异黄酮(Glycyrrhisoflavone)组成。　　 2.GC-5体外对Hela、SGC-7901细胞的生长、增殖均有抑制作用，且抑制作用具有剂量和时间依赖性。　　 3.AO/EB双荧光染色、透射电镜观察到GC-5作用后，Hela、SGC-7901细胞均出现典型凋亡细胞形态。　　 4.DNA裂解片段凝胶电泳分析，GC-5作用组出现明显“阶梯状”条带。　　 5.流式细胞仪检测显示：GC-5对Hela、SGC-7901细胞的诱导凋亡作用呈现明显的浓度依赖性。　　 6.Western Blot测定结果显示，经GC-5(25μg/ml)不同时间作用Hela、SGC-7901细胞，以及不同浓度GC-5作用后，均有促进Caspase-9、Caspase-3酶原活化的作用，并可检测到活化片断。GC-5可下调抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达和上调促凋亡蛋白Bax的表达。　　 结论：　　 1.从甘草中分离提取到甘草抗肿瘤活性成分(GC-5)，其由甘草香豆酮(Licocoumarione)、甘草吡喃香豆素(Licopyranocoumarin)、甘草异黄酮(Glycyrrhisoflavone)组成。　　 2.GC-5对人Hela、SGC-7901细胞的增殖均有抑制作用，且其抑制作用具有剂量-时间依赖性。　　 3.GC-5可在体外诱导人Hela、SGC-7901细胞的凋亡。　　 4.GC-5能裂解Caspase-9、Caspase-3蛋白酶原，并调控抑制凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表达。推测GC-5诱导人Hela、SGC-7901细胞凋亡可能与线粒体途径有关。　　 第二部分　　 目的：探讨连翘抗肿瘤活性成分(LQ-4)体外对人宫颈癌Hela、人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用，初探其抗肿瘤作用机制。　　 方法：　　 1.通过水提取、醇沉、大孔吸附树脂柱层析、制备型薄层层析，分离、提取连翘抗肿瘤活性成分(LQ-4)，并通过UPLC/Q-TOF MS等进行成分鉴定。　　 2.MTT比色法观察LQ-4对Hela、SGC-7901细胞增殖的抑制情况。　　 3.AO/EB双荧光染色法、透射电镜观察细胞凋亡的形态学变化。　　 4.琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞特征性DNA条带。　　 5.流式细胞仪测定细胞的凋亡率。　　 6.Western Blot测定LQ-4(50μg/ml)不同时间作用于Hela、SGC-7901细胞，以及不同浓度LQ-4作用于Hela细胞24h、SGC-7901细胞12h后，各组细胞中凋亡相关蛋白的表达水平。　　 结果：　　 1.用肿瘤细胞增殖抑制作用为导向的化学分离方法，从连翘中分离提取到连翘抗肿瘤活性成分(LQ-4)，经UPLC/Q-TOF MS成分鉴定，其由6种已知成分(白桦脂酸(Betulinic acid)、齐墩果酸(Oleanolic acid)、熊果酸(Ursolicacid)、咖啡酸(Caffeic acid)、软脂酸(Palmitic acid)、硬脂酸(Stearic acid))和8种未已成分组成。　　 2.LQ-4体外对Hela、SGC-7901细胞的生长、增殖均有抑制作用，且抑制作用具有剂量和时间依赖性。　　 3.AO/EB双荧光染色、透射电镜观察到LQ-4作用后，Hela、SGC-7901细胞均出现典型凋亡细胞形态。　　 4.DNA裂解片段凝胶电泳分析，LQ-4作用组出现明显“阶梯状”条带。　　 5.流式细胞仪检测显示：LQ-4对Hela、SGC-7901细胞的诱导凋亡作用呈现明显的浓度依赖性。　　 6.Western Blot测定结果显示，经LQ-4(50μg/ml)不同时间作用于Hela、SGC-7901细胞，以及不同浓度的LQ-4作用细胞后，均有促进Caspase-9、Caspase-3酶原活化的作用，并且LQ-4可下调Bcl-2蛋白表达，增加Bax蛋白的表达。　　 结论：　　 1.从连翘中分离提取到连翘抗肿瘤活性成分(LQ-4)，其由6种已知成分(白桦脂酸(Betulinic acid)、齐墩果酸(Oleanolic acid)、熊果酸(Ursolic acid)、咖啡酸(Caffeic acid)、软脂酸(Palmitic acid)、硬脂酸(Steadc acid))和8种未已成分组成。　　 2.LQ-4对人Hela、SGC-7901细胞的增殖均有抑制作用，且其抑制作用具有剂量-时间依赖性。　　 3.LQ-4可在体外诱导人Hela、SGC-7901细胞的凋亡。　　 4.LQ-4能裂解Caspase-9、Caspase-3蛋白酶原，并调控抑制凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表达。　　 第三部分　　 目的：　　 初探龙胆抗病毒有效部位(RG4-1)体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。　　 方法：　　 1.以抗病毒作用为化学分离的导向，经水提取、醇沉、两次大孔吸附树脂柱层析从龙胆中分离、提取龙胆抗病毒有效部位(RG4-1)。　　 2.以细胞病变效应(CPE)观察RG4-1对RSV在细胞内增殖的抑制作用。　　 结果：　　 1.龙胆经水提取、醇沉、两次柱层析得到龙胆抗病毒活性成分(RG4-1)。　　 2.RG4-1半数中霉浓度(TC50)为8.35mg/ml，半数有效浓度(EC50)为36.56μg/ml，治疗指数(TI)为227。　　 结论：　　 龙胆抗病毒活性成分RG4-1体外对呼吸道合胞病毒具有良好的抑制作用。