上皮间质化相关蛋白在结直肠癌患者中的表达

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目的:本研究通过检测结直肠癌、结肠息肉的手术或者活检标本中的E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平研究癌细胞的上皮间质化的发生情况;进一步研究直肠癌患者、肠息肉患者和健康志愿者中的血清中TGF-β1、Smad-3和Smad-7水平,结合患者的临床数据,揭示结肠癌组织中上皮间质转化(EMT)、血清TGF-β-smad通路相关蛋白水平与结肠癌患者临床特点的三者的相关性。方法:选取2012年2月~2015年9月间在淮南市第一人民医院胃肠外科、消化内科136例诊断为结直肠癌的患者和94例结肠息肉患者及60例体检健康成年人为研究对象。将结肠癌患者、结肠息肉患者和健康成年人分为实验组、对照组和空白组。留取实验组和对照组的手术或者内镜活检的标本,通过石蜡包埋和切片,免疫组织化学染色方法(immunohistochemistry stain,IHC)检测标本中的上皮标记物E-cadherin和间质细胞标记物Vimentin的表达情况,收集实验组和对照组接受治疗之前血样,同时收取同期体检的健康成年志愿者的血样,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中TGF-β1、Smad-3和Smad-7的表达水平。本研究统计使用SPSS22.0版本。IHC染色评分依据染色强度和阳性细胞比例进行评分,结果为等级资料。血清的ELISA结果为计量资料,统计分析采用均数±标准差(?x±s)。采用秩和检验统计分析实验组和对照组之间的组织的E-cadherin和Vimentin蛋白的表达差异。方差分析实验组、对照组、空白组的血清的TGFβ1、smad3和smad7的组间差异性。在实验组中依据dukes分期行组内分析。在实验组依据组织中smad3和smad7表达分层,分析组织和血浆中smad3和smad7的相关性。上述分析均以P<0.05作为统计差异的显著性阈值。结果:实验组的组织标本中E-cadherin的表达量低于对照组(P<0.01),V imentin的表达量高于对照组(P<0.01)。ELISA结果表明实验组血清中TGF-β1和Smad-3表达水平明显高于对照组和空白组(P<0.01),Smad-7的表达水平明显低于对照组和空白组(P<0.01);空白组和对照组之间血清的TGF-β1、S mad-3均无统计学差异。发生肿瘤转移的患者,即分期在DukesC、D期患者的T GF-β1、Smad-3含量比DukesA、B组患者升高,而smad7含量下降。结论:在结直肠癌的发病过程中,结肠癌细胞发生了EMT变化,并且组织中的TGFβ1/smad通路激活,而血清中的TGFβ1、Smad-3和Smad-7变化与患者的肿瘤Dukes分期相关,并能在一定程度上反映原发灶的TGFβ1/smad通路激活变化,可能在结直肠癌的发展过程中起重要作用。
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