小鼠异基因骨髓单个核细胞多次输注诱导免疫耐受的初步研究

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目的:通过动物实验尝试短期免疫抑制剂联合多次骨髓单个核细胞的输注诱导免疫耐受的可能性。方法:以主要组织相容性复合物(MHC)不同的小鼠C57BL/6为受体,BALB/c为供体,建立异基因骨髓移植动物模型。将C57BL/6小鼠随机分为四组:对照组、CsA组、BMT组、CsA+BMT组。CsA组、CsA+BMT组小鼠分别于实验第1-3、7-9、13-15天给予环孢素A,5mg/kg, q12h。BMT组和CsA+BMT组受体小鼠分别于实验第3、9、15天行供体BALB/c小鼠的骨髓细胞移植,每只小鼠每次移植5×106个骨髓单个核细胞。3次骨髓单个核细胞移植后第14天行单向混合淋巴细胞反应(MLR)、送检嵌合体和皮肤移植。记录MLR刺激指数(SI)与移植皮片存活时间。结果:混合淋巴细胞反应显示BMT组、CsA+BMT组的刺激指数(SI)与正常对照组和CsA组相比明显受抑制,差异有统计学意义(P<0.01),但BMT组与CsA+BMT组相比差异无统计学意义(P>0.05)。经PCR方法行嵌合体检测结果显示CsA+BMT组嵌合体检出率为(50%),BMT组嵌合体检出率为(20%)。皮肤移植结果证实,BMT(15.60±1.82天)与CsA+BMT组(21.40±2.88天)小鼠的皮肤移植物的平均存活时间均长于对照组(11.00±1.87天)(P<0.05)。CsA+BMT组与BMT组相比皮片存活时间延长,差异有统计学意义(P<0.01)。第三方KM小鼠皮肤移植物的平均存活时间(11.80±1.48天)与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),与CsA+BMT组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:短期免疫抑制剂联合多次骨髓单个核细胞的输注是可能诱导免疫耐受的一种新的方法。
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