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目的：癫痫发作有多种病因，谷氨酸受体兴奋所引起的神经元凋亡是其分子机制之一。海人藻酸受体作为癫痫相关度较高的离子型兴奋性谷氨酸受体的一种引起了广泛的注意。KA刺激诱导蛋白质巯基亚硝基化／去亚硝基化共价修饰，引起神经元损伤。Trx系统能够调节Fas介导的线粒体内SNO-procaspase-3的去亚硝基化，使caspase3活性增加促进细胞凋亡。我室前期已经报道过KA刺激使用KA的剂量及刺激后时间。本文拟研究KA是否通过KA受体导致Trx1去亚硝基化，并观察一些药物KA受体抑制剂NS102，外源性NO供体GSNO和SNP，TrxR1抑制剂金诺芬(Auranofin)和DNCB，FasL反反义寡核苷酸能否抑制Trx1去亚硝基化，从而对神经元起到保护作用，并确定Trx1的去亚硝基化能够导致下游蛋白procaspase-3的去亚硝基化，激活caspase3。
方法：侧脑室注射海人藻酸模拟大鼠癫痫模型，再分别给予NS102(10mM)、GSNO(100μg/kg)，SNP(5mg/kg)，FasLAS-ODNs(10nmol/10μl，注射三次)，Auranofin(10mM)，DNCB(60μg/10μl)。采用生物素转化法，免疫印迹、免疫组化，免疫沉淀方法对蛋白质的亚硝基化以及蛋白与蛋白之间的相互作用进行研究。采用焦油紫染色研究海马CA1和CA3/DG区神经元细胞损伤情况。
结果：
1．静息条件下海马CA1和CA3/DG区Trx1具有一定的翻译后亚硝基化修饰。KA刺激6h后Trx1发生了去亚硝基化，且去亚硝基化水平最高。
2．给予SNP、GSNO、NS102、FasLAS-ODNs、Auranofin、DNCB均能够抑制Trx1的去亚硝基化，说明了Trx1的去亚硝基化与离子型谷氨酸受体，外源性NO供体，Fas-FasL系统和及其自身的Trx1还原酶有关。
3．免疫组化的结果进一步揭示了Trx1去亚硝基化所涉及的相关机制。
4．焦油紫染色的结果表明抑制Trx1去亚硝基的药物具有抗KA诱导的海马神经元损伤作用。
5.TUNEL凋亡检测的结果进一步证实了焦油紫染色的结果，表明通过抑制TRX去亚硝基化可以抗脑缺血诱导的海马神经元凋亡。
结论：KA刺激诱导Trx1去亚硝基化，其机制可能是：KA刺激激活含有GluR6亚基的KA受体，导致FasL表达上调，FasL与Fas结合引起Trx1去亚硝基化，进而激活Caspase3，引起细胞凋亡。另外KA刺激诱导的Trx1去亚硝基化与自身的Trx1还原酶有关。而一些药物如KA受体抑制剂NS102，NO供体GSNO和SNP，FasL反义寡核苷酸，TrxR的抑制剂Auranofin和DNCB均能够抑制Trx1的去亚硝基化，从而保持其还原活性，并且保护了神经元。