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目的:观察银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,GBE)对糖尿病性白内障(diabetic cataract,DC)大鼠晶状体及离体高糖培养的晶状体的保护作用和可能的作用机制。 方法:1.雄性SD大鼠随机选取8只作为正常组大鼠,其余50只一次性腹腔注射链脲霉素(streptozotocin,STZ)65mg/kg诱导糖尿病模型。成模的糖尿病大鼠再分成5组:DC模型组,GBE低、中、高剂量治疗组(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)和苄达赖氨酸(bendazaclysine,BDL)阳性药对照组(200mg/kg),疗程12周。 2.M199培养液培养大鼠晶状体组织,将其分为正常对照组(NS组,葡萄糖终浓度2.40mmol/L);高糖组(HG组,葡萄糖终浓度52.35mmol/L);GBE低、中、高剂量组(10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml)和BDL组(0.5μmol/L),培养5d后收集晶状体组织。 3.裂隙灯观察大鼠晶状体变化并对其混浊度进行分级;NIH Image J图像处理软件计算离体培养晶状体图像灰度值,对晶状体混浊程度进行分析;ELISA法测定晶状体中糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)含量:可见光分光光度法测定过氧化氢酶(catalase,CAT),谷胱甘肽(glutathione,GSH)和总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)三种抗氧化指标的水平;荧光分光光度法测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性;免疫印迹法测定AR相对表达水平。 结果:1.在整体动物模型上,NS组大鼠晶状体清亮、透明,DC组大鼠晶状体明显混浊。与DC组相比,GBE中高剂量组大鼠晶状体混浊程度明显减轻。与NS组比较,DC模型组CAT、GSH、T-SOD酶活力明显降低(P<0.01);GBE中高剂量组的晶状体CAT、T-SOD和GSH酶活力与DC组比较有明显增强(P<0.05或P<0.01)。DC大鼠的AR表达水平明显高于正常大鼠(P<0.01);与DC组比较,GBE中高剂量治疗组的AR表达降低(P<0.01)。与NS组相比,DC组大鼠晶状体中的AGEs相对含量明显升高(P<0.01),给予高剂量GBE治疗的大鼠晶状体AGEs含量有所下降(P<0.05)。 2.在离体培养的晶状体组织上,高糖培养的晶状体与NS组相比混浊度明显增高(P<0.01),GBE中高剂量组与HG组相比,晶状体混浊度有所减轻(P<0.01)。与NS组比较,HG组晶状体组织中CAT、GSH、T-SOD等抗氧化酶活力明显降低(P<0.01);GBE中高剂量组的大鼠CAT、T-SOD和GSH酶活力相较DC组有明显增强(P<0.05或P<0.01)。与NS组比较,HG组晶状体AR的活力和表达水平显著升高(P<0.01);高剂量的GBE则可使AR的活力和表达水平降低(P<0.01)。与NS组比较,HG组晶状体中的AGEs相对含量明显升高(P<0.01);与HG组相比,GBE高剂量组晶状体AGEs含量显著下降(P<0.01)。 结论:GBE可能通过增强抗氧化能力、抑制AGEs产生及AR活性,降低整体和离体晶状体混浊度,对DC的防治具有积极作用。