【目的】本试验以建立小鼠分泌性腹泻模型为基础,利用葎草醇提物对腹泻小鼠进行治疗,通过研究葎草醇提物治疗腹泻效果及肠道离子通道相关基因的表达,探索葎草醇提物抗腹泻的可能分子机理,为开发新型抗腹泻药物及葎草资源的进一步利用和规模化推广应用提供理论性的科学依据。【方法】1、选取5~6周龄、体重为22±1.02 g的SPF雄性小鼠30只,随机分为空白对照组、腹泻模型组、葎草治疗组(每组10只),除空白组外,其余两组均用番泻叶灌胃,每只1 ml致腹泻模型。30 min后,空白组和腹泻组小鼠灌以0.6 ml/只的生理盐水;葎草治疗组灌以0.6 ml的葎草醇提物(黄酮含量3.47%),试验周期为7天,计数每天内的大便性状及糊状便的次数,观察小鼠精神状态、体重变化、DAI评分、结肠肠壁厚度以及其组织病理变化的情况,评价葎草醇提物对小鼠的抗腹泻作用;2、将试验中的各组小鼠在7天灌胃后全部处死,剪取各组小鼠结肠近端的组织进行标记,采用RT-PCR检测各组小鼠结肠相关离子通道基因的表达:钠离子通道(NHE2、NHE3、NHE8)、水离子通道(AQP2、AQP3、AQP4、AQP8)及氯离子通道(CFTR);采用Western blot检测目的蛋白的表达,分别从m RNA转录及蛋白表达水平阐明葎草醇提物治疗腹泻的可能分子机理。【结果】1、治疗组与腹泻组相比,对小鼠精神恢复、体重变化以及肠绒毛恢复等均有明显治疗的作用;腹泻组小鼠试验周期内,精神萎靡,大便次数增加、饮食减少,体重下降明显,对粪便潜血鉴定得出在第3天时大约84%的小鼠潜血结果为阳性,小鼠粪便经肉眼观察可见明显的出血,腹泻组的小鼠有不同程度的粪便出血情况表明造模成功。治疗组小鼠较腹泻组健康,随着治疗时间的延长,基本恢复正常,粪便潜血试验已经呈现出阴性;治疗组相对腹泻组体重有显著的上升趋势;相对于腹泻组,治疗组与空白组DAI的评分明显降低;治疗组肠壁厚度较腹泻组显著增加,治疗效果显著。病理组织学观察,空白组小鼠小肠绒毛排列整齐,各层次结构清晰,绒毛间质无水肿、无小血管扩张充血,而腹泻组小鼠小肠绒毛排列紊乱,大部分绒毛脱落,绒毛表面有炎性渗出,绒毛间质水肿,小血管扩张、充盈。治疗组与腹泻组相比症状明显改变,小肠绒毛排列整齐,绒毛表面炎性渗出大部分消失,绒毛间质无明显水肿、无小血管扩张、充血,小肠结构与正常组织大致相同,治疗效果明显;2、RT-PCR结果显示,与空白组小鼠相比,腹泻组NHE2、NHE3、NHE8、AQP3、AQP4、AQP8、CFTR的表达明显下调(P<0.05),AQP2的表达无明显变化(P>0.05);与腹泻组相比,治疗组小鼠AQP3、AQP4、AQP8的表达明显上调,NHE2,NHE3、NHE8、CFTR的表达无显著性变化;Western blot结果显示,与空白组相比,腹泻组AQP3、AQP4、AQP8蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与腹泻组相比,治疗组小鼠AQP3、AQP4、AQP8蛋白表达水平上调(P<0.05),具有统计学意义。【结论】1、葎草醇提物对小鼠分泌性腹泻具有很好的治疗效果,对小鼠结肠肠粘膜结构具有保护功能;2、葎草醇提物可以通过调节水通道蛋白(AQP3、AQP4、AQP8)的转录和翻译,治疗腹泻。