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第一部分 MRSP通过抑制内膜细胞增殖减轻血管损伤后内膜增生目的:Mfn2是Ras的负调控因子,能够抑制VSMCs的增殖,我们前期研究发现P21ras功能序列是Mfn2发挥抗VSMCs增殖作用的最小功能序列,在此基础上人工合成仅含16个氨基酸的Mfn2基因相关多肽（Mfn2 Related Synthetic Peptide,MRSP）,有显著抗VSMCs增殖的作用,尚缺乏体内研究。本研究旨在探讨MRSP对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜细胞增殖的影响。方法:雄性SD大鼠随机被分为4组:假手术组（Sham组）、模型组（Model组）、BSA阴性对照组（2mg/只）和MRSP组（2mg/只）,成功建立大鼠颈动脉球囊损伤后再狭窄模型,术后7天和14天处死动物并取材。HE染色观察损伤后7天和14天血管内膜增生情况;PCNA免疫组织化学染色评价新生内膜细胞增殖率;WB检测细胞周期相关蛋白cyclin D1、p21及P-raf-1、ERK1/2、P-ERK1/2的表达水平。结果:HE染色结果显示BSA组和Model组内膜面积、中膜面积、I/M比值和管腔面积无统计学差异,MRSP明显减轻新生内膜面积和I/M值（P<0.01）,损伤后7天和14天I/M比值分别降低约80%和65%,并且使损伤后14天管腔面积明显增加（P<0.05）,但不影响颈动脉中膜厚度。PCNA免疫组化结果显示MRSP明显降低损伤后14天内膜PCNA染色阳性细胞比例（P<0.01）。WB结果显示MRSP明显降低cyclin D1蛋白表达,升高P21蛋白表达水平（P<0.01）;MRSP抑制P-raf-1和P-ERK1/2表达（P<0.01）,从而发挥抗细胞增殖作用。结论:MRSP通过抑制内膜细胞增殖减轻大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生,调节细胞周期蛋白cyclinD1、P21的表达,主要通过抑制raf-ERK1/2信号通路介导,为应用于支架涂层药物的开发提供实验依据。第二部分MRSP通过促进内膜细胞凋亡减轻血管损伤后内膜增生目的:前期研究表明,MRSP也具有促VSMCs凋亡的作用,尚缺乏体内研究。本部分旨在研究MRSP对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜细胞凋亡的影响,并研究其相关的分子机制。方法:雄性SD大鼠随机分为4组:Sham组、Model组、BSA组（10mg/只）和MRSP组（10mg/只）,成功建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,术后14天处死动物并取材。采用原位末端标记法（TUNEL）检测损伤后14天血管内膜细胞凋亡率;WB检测cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-9、p-ATK、AKT的表达水平。CD31免疫组化染色评价血管损伤后再内皮化指数。结果:TUNEL荧光染色显示,颈动脉球囊损伤后14天,Model组和BSA组内膜细胞无明显凋亡发生,与其相比,MRSP明显升高内膜细胞的凋亡率（P<0.01）。WB检测结果显示,与Model组和BSA组相比,MRSP明显升高cleaved-capase3表达水平,升高Bax/Bcl-2比值（P<0.01）,进一步证实MRSP促进颈动脉球囊损伤后新生内膜细胞凋亡;MRSP明显升高cleaved-caspase-9的表达（p<0.01）,而未影响cleaved-caspase-8的表达,MRSP通过线粒体途径促进血管损伤后新生内膜细胞发生凋亡;MRSP明显抑制AKT蛋白的磷酸化水平（p<0.01）。CD31免疫组化染色结果显示,与Model组和BSA组相比,MRSP不影响CD31表达,不影响再内皮化指数（p>0.05）。结论:MRSP明显促进大鼠颈动脉球囊损伤后内膜细胞凋亡,从而减轻内膜增生,分子机制是MRSP通过抑制Akt磷酸化,从而激活caspase-9和caspase-3,升高Bax/Bcl-2比值,启动线粒体凋亡途径促进内膜凋亡,此外,MRSP在促进内膜细胞凋亡的同时不影响血管再内皮化,具有重大意义。第三部分MRSP对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜纤维化的影响目的:胶原纤维沉积导致内膜纤维化是血管球囊损伤或支架植入后发生再狭窄的重要原因,本部分旨在研究MRSP对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜纤维化的影响。方法:雄性SD大鼠随机被分为4组:Sham组、Model组、BSA组（2mg/只）和MRSP组（2mg/只）,术后21天处死动物并取材。HE染色观察损伤后21天血管内膜增生情况;Masson染色测定新生内膜胶原面积;MMP2免疫组化染色评价MMP2原位表达的情况。结果:HE染色结果显示颈动脉球囊损伤后21天,BSA组和Model组内膜进一步增厚,管腔严重狭窄,MRSP组明显减轻内膜面积和I/M值（P<0.01）,增加管腔面积（P<0.01）,但不影响颈动脉中膜厚度。Masson染色结果显示,与Model组和BSA组相比,MRSP显著降低胶原面积,减轻纤维化（P<0.01）。MMP2免疫组化结果显示MRSP显著抑制MMP2在新生内膜组织原位的表达（P<0.01）。结论:MRSP减少颈动脉球囊损伤后21天内膜胶原面积,抑制内膜纤维化,可能通过抑制MMP2的表达实现的,进一步显示其抑制新生内膜增生的优越性。