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本研究拟将本实验室自己分离的生防菌株TS67开发为一种高效、广谱、廉价的生物杀菌剂,为此对青霉TS67的液体发酵工艺、防病促生效果及制剂化工艺进行了初步研究。以玉蜀黍平脐蠕孢菌(Bipolaris maydis)和大豆尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)为指示菌株,验证11株渤海海洋霉菌的抑菌活性。结果表明,菌株TS67对两种病原菌均有很强的抑制作用,100μL发酵上清液对F.oxysporum和B.maydis的抑菌圈直径分别达到了20.3mm和13.6mm。采用正交试验实验方法,研究了青霉TS67菌株的最佳发酵培养基,结果表明蛋白胨、NaCl和葡萄糖各因素对青霉TS67抗生素产量的影响依次减弱。发酵培养基的最佳配方为葡萄糖1%、蛋白胨0.2%、NaCl25g/l、吐温-80 0.1%。单因素实验证实菌株TS67的最佳发酵条件为28℃,170r/min,8%的接种量,接种时间45h,上液量75ml,起始pH值为6,发酵培养96h。同时发现降低稳定期摇床转速能明显增加抗菌物质的产量。在30L发酵罐中培养TS67菌株,在8%接种量,40%上液量,1:0.9通气量,28℃150r/min的条件下发酵培养至pH4.8,所得发酵液对大豆根腐病效价为3029U/mg,发酵液对玉米小斑病效价为2735U/mg。30L发酵罐最佳发酵条件为转速200r/min,通气量1:0.9vvm。采用盆栽试验的方法,通过病情指数和防治效率等指标研究青霉TS67菌株的发酵液、发酵上清液和菌体对大豆根腐病及玉米小斑病的影响。实验结果的SPSS统计分析表明,青霉TS67的所有处理均能显著(P＜0.01)抑制大豆根腐病及玉米小斑病的发生。而且用青霉TS67进行大豆拌种能有效促进大豆幼苗生长。采用60%-80%饱和度硫酸铵对青霉TS67发酵液进行盐析,获得抗菌物质粗制品,并以其为原药,通过表面活性剂的筛选和配伍,确定了3种TS67微乳剂配方。通过正交实验获得TS67最佳产孢培养基的配方为:蔗糖0.9499%,硝酸钠0.1847%,酵母膏0.1%,人工海水60%,琼脂2%,蒸馏水40%,pH6。利用该培养基培养青霉TS67获得分生孢子粉,并与载体油A制成油剂,实验结果表明,当孢子粉含水量≤5%时,以孢子萌发率为指标,该油剂可以在4℃低温黑暗条件下贮存180天。将贮存后的菌株TS67发酵培养,其发酵液对大豆根腐病效价为3146U/mg,对玉米小斑病效价为2645U/mg,保持了新鲜TS67菌株76%的抑菌活力。