红托竹荪多糖的分离纯化、结构分析及其生物活性研究

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竹荪是(Dictyophora)鬼笔科竹荪属真菌,是世界上名贵的食用菌之一。世界上分布的有12种,在我国分布有7种,红托竹荪是其中的佼佼者之一,外形美丽,营养丰富,味道鲜美。红托竹荪(Dictyophora rubrovolvata)是一种担子菌,珍贵的药食两用真菌。富含多种生物活性成分,如氨基酸、维生素、无机盐和多糖等,具有降血压、降血脂、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等功效。其中多糖是红托竹荪子实体中主要的有效成分。目前,对红托竹荪多糖的研究还不是很深入、全面。因此本文主要以红托竹荪为原料,对红托竹荪多糖的提取、分离纯化、结构解析、抗氧化活性和抑菌作用进行了研究,主要研究成果如下:(1)采用热水浸提法提取红托竹荪多糖,在单因素试验基础上,采用响应曲面法对提取工艺进行优化,建立了热水浸提红托竹荪多糖的二次多项数学模型,模型方程为:Y=0.113867+0.001551×X2+0.0011X3+0.005054×X4-0.016834×X12-0.013365×X22-0.015177×X32+0.002763×X3×X4-0.01697×X42得到的优化提取工艺参数为:浸提时间3.5h,浸提温度75.3℃,料液比1:31,提取次数2,在此条件下,红托竹荪多糖的得率为12.05%。(2)红托竹荪多糖粗品经DEAE-52阴离子交换柱层析分离得到不同组分,再采用SephadexG-100凝胶柱层析进一步纯化得红托竹荪多糖组分DR1、DR2和DR3,通过比旋光度法、高效液相色谱法(HPLC)鉴定验证均为均一多糖组分。(3)通过气相色谱分析得多糖组分的单糖组成,DR1由葡萄糖组成,DR2由木糖组成,DR3半乳糖组成;通过高效液相色谱分析得多糖组分DR1、DR2、DR3的分子量分别为6.12×103Da、8.73×103Da、1.01×104Da。(4)用红外光谱和核磁共振确定红托竹荪多糖DR1具有α-吡喃环构型,DR2和DR3均为β-吡喃环构型。(5)红托竹荪粗多糖的体外抗氧化活性的研究结果表明:红托竹荪多糖具有较强还原能力,在所测定的浓度范围内,红托竹荪粗多糖对超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)、DPPH-自由基具有一定的清除作用,且多糖浓度和清除效果间存在良好的量效关系。(6)红托竹荪粗多糖的抑菌活性研究结果表明:红托竹荪多糖对细菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌)、真菌(啤酒酵母、苹果青霉)均有抑菌作用,且对细菌的抑制作用大于真菌。
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