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目的1.研究重庆地区汉族老年人群Klotho G-395A、F352V与C370S三个位点单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)及其等位基因与组合的频率分布特征。2.探讨重庆地区汉族老年人群Klotho G-395A、F352V与C370S三个位点的SNP与原发性骨质疏松症的相关性。方法1.采用等位基因特异性引物PCR技术检测重庆地区汉族老年人群1495例Klotho G-395A、F352V与C370S三个位点的SNP,并采用聚类分析方法分析其基因多态性的频率分布特征。2.采用等位基因特异性引物(Allelic specific primer,ASP)PCR技术检测重庆地区汉族老年人群300例原发性骨质疏松症患者和93例对照者Klotho G-395A、F352V与C370S三个位点的SNP,并比较两组基因型的频率分布。结果1. Klotho G-395A SNP的GG、GA与AA基因型频率分别为47.69%、42.61%和9.70%,G、A等位基因频率分别为69.00%和31.00%;Klotho F352V SNP的FF、FV与VV基因型频率分别为35.52%、58.93%和5.55%,F、V等位基因频率分别为64.98%和35.02%;Klotho C370S SNP的CC、CS与SS基因型频率分别为37.32%、58.80%和3.88%,C、S等位基因频率分别为66.72%和33.28%。研究发现了Klotho基因三个位点SNP的前10种组合基因型分布: Klotho G-395G+F352V+C370S 253例(16.92%)、Klotho G-395A+F352V+C370S 241例(16.12%)、Klotho G-395G+F352V+C370C 152例(10.17%)、Klotho G-395A+F352V+C370C 131例( 8.76% )、Klotho G-395G+F352F+C370S 126例(8.43%)、Klotho G-395A+F352F+C370C 121例(8.09%)、Klotho G-395G+F352F+C370C 109例(7.29%)、Klotho G-395A+F352F+C370C 86例(5.75%)、Klotho A-395A+F352V+C370S 52例(3.48%)、Klotho A-395A+F352F+C370C 30例(2.01%)、Klotho G-395G+V352V+C370S 30例(2.01%)。2.在Klotho G-395A SNP中,原发性骨质疏松症组患者AA基因型频率较对照组高,有显著性差异(P <0.01),按性别分层研究则仅男性原发性骨质疏松症患者AA基因型频率较对照组高,有显著性差异(P<0.01);在Klotho F352V SNP中,无论男性还是女性原发性骨质疏松症患者其FF、FV与VV各基因型频率与对照组比较均无显著性差异(P>0.05);在Klotho C370S SNP中,无论男性还是女性原发性骨质疏松症患者其CC、CS与SS各基因型频率与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论1.本研究揭示了Klotho基因三个位点等位基因、基因型及其组合基因型的频率分布特征,为进一步开展Klotho基因及其蛋白的表达研究提供了依据和线索。2.研究发现Klotho G-395A SNP与原发性骨质疏松症有相关性,并存在着性别差异性;但尚未发现Klotho F352V与C370S SNP与原发性骨质疏松症有相关性。