【摘 要】
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哺乳动物细胞浆中的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase，TxR1)与它的底物硫氧还蛋白(thioredoxin，Trx1)及其辅酶NADPH组成Trx1系统。该系统在调控体内氧化还原平衡、细胞
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哺乳动物细胞浆中的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase，TxR1)与它的底物硫氧还蛋白(thioredoxin，Trx1)及其辅酶NADPH组成Trx1系统。该系统在调控体内氧化还原平衡、细胞生长及凋亡中起重要作用。因此，Trx1系统功能异常，会导致氧化应激及细胞功能紊乱。然而，Trx1/TrxR1在疾病发生发展中的作用尚未阐明。已知胰岛素抵抗常伴随氧化应激。我们以高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠为模型，运用蛋白组学、酶联免疫和生化分析等技术，证明了胰岛素抵抗小鼠肝脏蛋白含量发生波动，这些差异蛋白主要涉及抗氧化、糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢、尿素循环、线粒体功能、蛋ogic/drug effectsHumansProtein达量下降，并伴随着它们棕榈酰化水平增高。通过细胞及分子水平的研究，我们发现Trx1/TrxR1棕榈酰化与胞内活性氧产生增加有关。这些现象归咎于TtxR1活性中心硒半胱氨酸(Sec)以及Trx1分子中结构半胱氨酸Cys62，Cys69或/和Cys73发生棕榈酰化，导致其抗氧化活性降低。由此，我们提出肝脏Trx1/TrxR1变化是高脂饮食引起胰岛素抵抗的一个新特征。 在氧化的环境中，TrxR1分子折叠紧密，其活性不受H2O2、 IAA、IAM影响，但是对含有很好离去基团的化合物，如DTNB和GSNO非常敏感。通过定点突变、活性测定和化学计算等方法，我们证明了DTNB和GSNO通过破坏硒硫键，抑制TrxR1活性的新分子机制。鉴于，氧化型TrxR1在细胞外可通过影响细胞基质蛋白而影响细胞迁移。因此，我们的实验结果，对研究以TrxR1为靶点的调控提供了新思路。
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