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研究背景: 胃癌是国内最常见的消化道恶性肿瘤之一,其发生、发展是多因素、多阶段的过程,目前对胃癌的早期诊断除了筛查尚无其它很好的方法,因此,早期胃癌诊断率低,胃癌患者初诊时以进展期的居多。胃癌的总体治疗效果及预后仍较差,至今仍缺少特异性的治疗靶点。因此,寻找新的肿瘤标记物,协助胃癌的早期诊断,并且为胃癌基因治疗提供新的生物学靶点有着重大的临床意义。 微小 RNA(miRNA)是近年来新发现的一类小分子非编码 RNA,它在细胞增殖、凋亡、分化、周期调控以及个体发育等方面发挥着重要的作用,而且越来越多的研究发现 miRNA在恶性肿瘤的发生发展中扮演着重要的角色,不同的肿瘤中具有不同特征的miRNA,甚至可以以miRNA表达谱来作为肿瘤的诊断和预后的标志物。但关于 miRNA在胃癌中表达情况的研究报道有限。国内外相关文献及前期关于胃癌 miRNA表达谱的研究,已表明 miR-191与胃癌具有一定的相关性,但 miR-191在胃癌的发生进展过程中具体发挥怎样的作用以及确切分子机制目前尚不清楚。 目的: 1.初步探讨 miR-191在胃癌组织中的表达及其临床意义。 2.利用生物信息学软件预测 miR-191的靶基因。 3.对预测的靶基因在胃癌组织中表达情况进行检测,分析 miR-191与靶基因在胃癌组织中表达的相关性。 方法 1.选取2009年4月至2010年12月经手术切除的原发性胃癌标本及配对癌旁正常组织标本各50例。实时荧光定量 PCR(real-time quantitative PCR, qRT-PCR)方法检测胃癌组织及癌旁组织中miR-191的相对定量,初步探讨miR-191在胃癌组织和癌旁组织中的表达差异以及与胃癌临床病理特征的相关性。 2.利用生物信息学软件(MiRanda、TargetScan及PicTar)对miR-191进行靶基因预测,选取3个软件均预测到的基因作为靶基因。 3. qRT-PCR方法对预测的靶基因PLCD1在胃癌和配对癌旁正常组织中的表达情况进行检测,初步探讨PLCD1基因在胃癌及癌旁组织中的表达差异及与胃癌患者临床病理特征的相关性,并初步分析 miR-191与PLCD1基因的相关性。 结果: 1.(1)在50例胃癌组织中34例(68%)miR-191呈高表达,miR-191在胃癌组织中的相对表达量是配对正常组织的2.0倍。胃癌组织中miR-191表达水平(M=0.031)高于正常胃组织(M=0.024),有显著性差异(P=0.015)。(2)按性别、年龄、病理组织学分型、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期对胃癌病人分别进行分组,各组间 miR-191表达情况均无显著差异性(P>0.05)。 2. PLCD1基因在 MiRanda、TargetScan、PicTa三个软件中均被预测为miR-191的靶基因。 3.(1)在30例胃癌组织中18例(60%)PLCD1 mRNA呈低表达,PLCD1 mRNA在胃癌组织中的相对表达量是配对正常组织的0.372倍。胃癌组织中PLCD1 mRNA表达水平(M=0.00041)低于正常胃组织(M=0.00521),有显著性差异(P=0.041)。(2)按性别、年龄、病理组织学分型、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期对胃癌病人分别进行分组,各组间 PLCD1 mRNA表达情况均无显著差异性(P>0.05)。 4.胃癌组织中miR-191与PLCD1 mRNA表达水平存在负相关性(r=-0.370,p=0.04)。 结论: 1. miR-191在胃癌组织中呈高表达,表达量与相关的临床病理特征(性别、年龄、病理组织学分型、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期)无相关性。 2.利用生物信息学软件预测 PLCD1为 miR-191的靶基因。 3. PLCD1 mRNA在胃癌组织中呈低表达,表达量与相关的临床病理特征(性别、年龄、病理组织学分型、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期)无相关性。 4. miR-191和其可能的靶基因 PLCD1在胃癌组织中的表达水平呈现负相关性,二者均有成为胃癌诊断和治疗新靶点的潜在可能性。