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研究目的探讨血管一氧化氮（nitric oxide，NO）神经对血管平滑肌增殖的影响及调控作用，为防治增生性血管疾病提供理论依据。实验方法一、实验分组与荧光金（Fluoro-gold,FG）逆行追踪将实验分为5组：（1）模型存活1d组;（2）模型存活5d组;（3）一氧化氮合酶（Nitricoxide synthase,NOS）抑制剂N’-硝基-L精氨酸（Nω-Nitro-L-arginine，LNNA）组，腹腔注射LNNA15mg/kg，共6天；（4）切交感神经组；（5）假手术组。FG逆行追踪具体方法是：将大鼠仰卧位,取颈部正中切口约3cm，逐层分离组织至暴露右侧颈总动脉鞘，用玻璃微管注射器往动脉外膜和中膜间缓慢注射1μl30%荧光金，留针15分钟；存活一周后用4%多聚甲醛灌注，分别取颈交感神经节和颈总动脉，每组3只动物用于western bolt检测增殖细胞核抗原（Proliferating cell nucle antigen，PCNA）的表达。二、FeCl3诱导平滑肌增殖模型将大鼠仰卧位固定，沿颈部正中线切开3cm左右的切口，将右侧颈总动脉暴露，用一5cm×2cm的塑料膜片垫在颈总动脉下方，在颈总动脉上方置一2×1mm含有1μL2.16mol/L FeCl3的滤纸[1]，20min后，取出滤纸和膜片，缝合皮肤，平滑肌增殖模型制成。三、NOS免疫组织化学染色和HE染色将切片用0.01PBS洗后，用含0.04％双氧水的甲醇封闭；正常羊血清封闭20min；入NOS抗体（1：500）4℃过夜；生物素化二抗室温30min；SABC室温30min，DAB显色3min；以上各步之间用0.01M PBS冲洗3次，封片,微镜下观察NOS表达。取各组颈总动脉作切片和HE染色，观察血管平滑肌增殖变化。结果FG逆行示踪表明颈总动脉壁主要由颈上神经节支配，颈交感神经节NOS免疫组织化学染色与FG示踪双标表明支配颈总动脉的交感神经中含有NO神经，并且NO神经支配颈总动脉。HE染色表明，血管受损后一天平滑肌就开始增殖，5天组增殖明显；但NOS抑制剂组（LNNA）和切除颈血管交感神经组比5天组增殖更明显。Western blot结果表明5天组与假手术组相比PCNA表达上调，而LNNA组和切除神经组PCNA表达上调更明显。结论1.支配颈总动脉的交感神经含NO神经。2.血管交感神经中NO神经参与了平滑肌增殖的调控。