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目的:本研究以仿制药一致性评价为契机,基于先进的超高液相色谱串联质谱技术,创建UPLC-MS/MS方法,测定人体血浆中阿伐曲泊帕的浓度。按法规要求开展马来酸阿伐曲泊帕片在中国健康志愿者空腹状态下的生物等效性（BE）预试验研究。同时,依托阿伐曲泊帕药代动力学试验,探索ABCB1、CYP2C9、CYP3A4/5和CYP2C8基因多态性对阿伐曲泊帕处置的影响。方法:1、创建UPLC-MS/MS法测定人血浆中阿伐曲泊帕的浓度,该方法采用电喷雾离子源正离子检测模式,以Avatrombopag（m/z:648.9→267.1）,Avatrombopag-d8（m/z:658.0→267.0）为定量离子对。色谱柱使用ACQUITY UPLC（?）BEH C18（2.1×30 mm,1.7μm）,流动相为:5 m M甲酸铵水溶液（水相）:乙腈（有机相）,采用梯度洗脱。流速为:0.4 m L/min,进样量为1μl,柱温为40℃,分离过程为3 min。根据国内外生物样品定量分析方法验证指导原则进行全面的方法学验证。2、与江苏省省级机关医院合作开展单中心、随机开放、单次给药、两制剂、两序列、四周期重复交叉设计空腹状态下药代动力学研究,纳入12例受试者。采用Win Nonlin 8.2计算药代动力学参数,进行预BE分析,评价受试制剂马来酸阿伐曲泊帕片（20 mg/片）与参比制剂（Kawashima Plant,Eisai Co.,Ltd,20 mg/片）在健康受试者空腹状态下的BE。3、本研究依托马来酸阿伐曲泊帕药代动力学实验,共筛选了ABCB1、CYP2C9、CYP3A4/5和CYP2C8基因上8个单核苷酸多态性（SNP）位点（rs1045642、rs1128503、rs2032582、rs1799853、rs2242480、rs776746、rs7909236、rs1057910）。采用SNap Shot技术对12例受试者进行基因分型,SPSS 26软件分析受试者基因型与药代参数相关性。结果:1、本研究开发了一种高效、快捷和高灵敏度的UPLC-MS/MS方法,该方法在3min内完成阿伐曲泊帕的分离,阿伐曲泊帕保留时间为1.5 min,在1.00 ng/m L～300 ng/m L浓度范围内线性良好,线性相关系数R~2＞0.99。该方法对阿伐曲泊帕选择性和专属性良好,不同来源个体的生物基质对测定结果无干扰,且分析物与内标互不干扰。阿伐曲泊帕批内准确度范围为-7.13%～7.73%,批内%CV≤6.86%,批间准确度为1.07%～10.90%,批间%CV≤7.78%,结果均符合要求。该方法对分析物和内标的提取回收率大于91%。普通血浆、溶血血浆和高脂血浆对测定结果无影响。储备液、工作液以及样品处理过程中稳定性验证均符合要求。该方法可精确测定血浆中阿伐曲泊帕浓度。2、11例受试者空腹两次服用参比制剂后Cmax,AUC0-t和AUC0-∞的SWR分别为0.528、0.456和0.461。SWR≥0.294,因此确定马来酸阿伐曲泊帕属于高变异药物。依据FDA与NMPA的BE指导原则,Cmax、AUC0-t和AUC0-∞采用参比制剂标度的平均生物等效性（RSABE）方法进行评价。结果表明11例受试者AUC0-t和Cmax的单侧95%置信上限分别为0.0164和0.0482大于0,不符合RSABE范围要求。利用Win Nonlin 8.2外推至22例,AUC0-t、AUC0-∞和Cmax几何均值比的点估计值在[0.80,1.25]范围内,且AUC0-t、AUC0-∞、Cmax的单侧95%置信区间上限≤0,符合RSABE范围要求。所以建议正式BE试验最少纳入22例受试者最大保证正式BE的成功。3、ABCB1 3435CC-2677GG基因型受试者表现出更低的血浆暴露量,更高的清除率,且AUC0-t和AUC0-∞具有统计学差异。对CYP3A4/5研究发现携带rs2242480 GA和rs776746 AG型受试者表现出更高的阿伐曲泊帕血浆暴露量,而携带rs2242480 GG和rs776746 GG型受试者阿伐曲泊帕血浆暴露量降低。对CYP2C8研究发现携带rs7909236 GT和rs17110453 AA型受试者表现出更高的阿伐曲泊帕血浆暴露量,而携带rs7909236 GG和rs17110453 CA型受试者阿伐曲泊帕血浆暴露量降低。但药代参数均无统计学差异。结论:本课题首次成功建立了快捷、高效和高灵敏度的UPLC-MS/MS方法测定血浆中的阿伐曲泊帕,进行了较为完整的方法学验证。引入Waston LIMS信息管理系统,高效完成了马来酸阿伐曲泊帕片在健康人体内的药代动力学研究。确定马来酸阿伐曲泊帕归属于高变异药物,为正式BE研究提供了试验依据。基因组学研究发现,ABCB1 3435CC-2677GG双突变与阿伐曲泊帕药代动力学参数显著相关。表现出更低的阿伐曲泊帕血浆暴露量,更高的清除率。