急性肾功能衰竭和慢性肾功能衰竭病情复杂、治疗棘手,严重地危害人类的健康和生命,也给社会带来了沉重的经济负担,迫切需要新的、有效的治疗手段在发病早期即可抑制原发病对肾脏的进一步损伤,尽可能挽救残余肾脏功能,延缓肾衰竭的发生。冬虫夏草是我国传统的天然名贵药用真菌,对肾脏组织有一定的保护和修复作用,临床上多用于肾脏疾病的治疗。但是,由于天然冬虫夏草非常稀有,一般多用从天然冬虫夏草中分离得到的菌种经人工培养获得的菌丝体代替,如百令胶囊、金水宝胶囊等。猫棒束孢是从天然冬虫夏草虫草体中分离得到的一株真菌,经中国科学院微生物研究所郭英兰教授鉴定为Isaria felina (DC.:Fr.) Fr.,是一株新的冬虫夏草菌种,已被中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(保藏号：CGMCC NO.0706)。猫棒束孢作为从冬虫夏草虫草体中分离得到的菌种,我们假想其发酵菌丝粉可能具有类似冬虫夏草的保护肾脏的功能。因此我们对猫棒束孢菌丝粉进行了肾脏保护功能的实验研究,以验证传统中医理论的正确性,同时也为猫棒束孢菌丝粉的临床应用研究提供实验依据。本文主要研究了猫棒束孢菌丝粉对实验性急性肾功能衰竭和慢性肾功能衰竭大鼠的防治作用效果,并对猫棒束孢的培养条件、猫棒束孢菌丝粉的毒理学、以及猫棒束孢菌丝粉保护肾脏的作用机理进行了初步的探讨,具体内容如下。(1)猫棒束孢的传代培养及液体培养工艺条件的确定将猫棒束孢在固体培养基上传代培养10d左右,选择生长良好的粗壮菌丝体收集于冻存管中,并在液氮罐中进行保藏。对猫棒束孢的液体发酵工艺进行初步的探索,经过对培养基、培养基装量、发酵温度、发酵时间等因素的考察,我们确定了猫棒束孢菌丝的最佳发酵工艺：培养基组成为蛋白胨0.6%,酵母膏1.2%,蔗糖2.4%,硫酸镁0.05%,磷酸二氢钾0.1%,并用饱和碳酸氢钠溶液调整pH为6.5左右；将500 mL培养基装于3000 mL三角瓶中,0.15 MPa高压灭菌40 min,冷却后接入猫棒束孢菌种,置于180 r·min-1摇床上,于26.5℃温度条件下旋转发酵培养48 h。(2)猫棒束孢菌丝粉的毒理学研究为了明确猫棒束孢菌丝粉的用药安全性,分别对猫棒束孢菌丝粉进行了急性毒性研究和长期毒性研究。在急性毒性研究中选择昆明种小鼠为受试动物,由于无法测得猫棒束孢菌丝粉的半数致死量,因此在实验中采用最大给药剂量法验证其急性毒性,测得昆明小鼠对猫棒束孢菌丝粉的最大给药剂量为30 g-kg-1,其结果大约相当于临床拟用剂量的900倍,说明猫棒束孢菌丝粉无急性毒性,具有良好的安全性。在长期毒性试验中选用Wistar大鼠为受试动物,实验分别观察连续灌胃给予猫棒束孢菌丝粉0.833 g·kg-1、1.65 g·kg-1和3.33 g·kg-1 12 w对大鼠的毒性作用。给药期间各猫棒束孢菌丝粉给药组大鼠生长状态良好,未见异常反应,未出现中毒症状及动物死亡,因此猫棒束孢菌丝粉对Wistar大鼠的无毒剂量为3.33 g·kg-1(约相当于临床拟用剂量的100倍)。毒理学研究结果表明,IFMP对实验大鼠和小鼠没有明显的毒性作用,具有较好的安全性。(3)猫棒束孢菌丝粉对甘油诱导的急性肾功能衰竭大鼠的防治作用研究采用后肢双侧肌肉注射甘油(50%,V/V)的方法建立急性肾功能衰竭动物模型,对Wistar大鼠肌肉注射50%甘油8 mL·kg-1后血清尿素氮和血清肌酐显著升高,肾小管严重扩张,管腔有大量蛋白管型,表明模型的建立是成功的。200 mg·kg-1猫棒束孢菌丝粉可显著降低甘油所致血清尿素氮和血清肌酐的升高,并明显减轻肾脏组织的病理改变,从而减轻甘油对大鼠造成的肾损害,提示猫棒束孢菌丝粉在200 mg·kg-1剂量下对甘油致大鼠急性肾衰具有防治作用。猫棒束孢菌丝粉能降低血浆内皮素-1含量和血清转化生长因子-β1含量,其对急性肾功能衰竭大鼠的防治作用可能与其降低血浆内皮素-1含量和血清转化生长因子-β1含量有关。(4)猫棒束孢菌丝粉对腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭大鼠的保护作用研究对SD大鼠连续灌胃给予100 mg·(kg·d)-1腺嘌呤30d成功建立了慢性肾功能衰竭动物模型。猫棒束孢菌丝粉在200 mg·kg-1剂量下可显著降低肾功能衰竭大鼠血清尿素氮、肌酐、尿酸含量,提高肾功能衰竭大鼠内生肌酐清除率,延缓慢性肾功能衰竭的进程；猫棒束孢菌丝粉还有利于改善慢性肾功能衰竭病情进展中常见的贫血症状。猫棒束孢菌丝粉对实验性慢性肾功能衰竭大鼠肾脏功能的改善作用可能是通过降低转化生长因子-β1信使核糖核酸表达水平、提高表皮生长因子信使核糖核酸表达水平,以及降低血浆内皮素-1水平、提高血清一氧化氮含量等途径实现,从而起到改善肾脏的病理性损伤、促进肾小管上皮细胞修复、恢复肾小管功能、阻止肾脏间质纤维化等作用,最终达到延缓慢性肾功能衰竭进程的目的。