【摘 要】
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天然存在的羧肽酶B是一种含锌原子的外肽酶,它可以特异性地从肽链中去除C端的碱性氨基酸,包括精氨酸、赖氨酸或鸟氨酸.羧肽酶B在商业和科研上有着很广泛的用途.目前商业上使
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天然存在的羧肽酶B是一种含锌原子的外肽酶,它可以特异性地从肽链中去除C端的碱性氨基酸,包括精氨酸、赖氨酸或鸟氨酸.羧肽酶B在商业和科研上有着很广泛的用途.目前商业上使用的羧肽酶B是从猪的胰腺纯化得到的,不仅价格昂贵,而且并不完全排除其他酶.我们用RT-PCR方法克隆了大鼠羧肽酶原B的cDNA编码序列,将其重组到原核表达质粒pET-21a中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体方式获得高表达.本论文在此基础上对重组菌的发酵条件进行了优化,对表达所形成的羧肽酶原B包涵体进行了变性和复性研究,并对酶解后释放出的羧肽酶B进行了纯化和性质鉴定.
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