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目的:安氏Ⅱ类错颌畸形是临床中最常见的一类错颌畸形。严重的错颌畸形不仅会导致患者出现功能障碍,而且它引起的美观问题常给患者造成心理压力,导致患者的自尊自信心水平降低,进而对患者学业、抗挫折能力以及社会活动参与度均产生不利影响[1]。根据发病机制,Ⅱ类错颌畸形可以分为:牙槽性、骨源性、颌位性及混合性,早期的颌位性错颌畸形如未进行及时干预,可能会发展成为严重的骨性错颌畸形。因此,我们提倡及早发现并治疗错颌畸形,从而降低它对患者身心健康造成的不利影响。对于下颌后缩的Ⅱ类错颌畸形患者,临床中常利用功能矫治器引导下颌前伸,实现神经肌肉适应性改建。若在矫治结束时,神经-肌肉改建仍未完成,则会导致矫治效果难以完全实现或容易复发。因此,本研究拟对功能矫治大鼠的咬肌颊车穴进行中频电刺激,观察大鼠的咬肌生理变化,以及大鼠咬肌中神经营养因子3(neurotrophin-3,NT-3)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达的变化,探讨穴位中频电刺激对神经-肌肉改建的影响,为临床中提高功能矫治的效率及减少复发率提供参考依据。方法:将60只4周龄雄性SD大鼠随机分为3组:空白对照组、条件对照组和实验组,每组20只。1.建立功能矫治联合颊车穴位中频电刺激大鼠模型:空白对照组大鼠,不进行任何处理;条件对照组大鼠,为其制作并戴用功能矫治器;实验组大鼠,在为其戴用功能矫治器的同时进行颊车穴位中频电刺激。2.大鼠咬肌组织切片HE染色:根据分组,进行相应处理后在第3、7、14、21 d处死大鼠,取其右侧咬肌中段组织制作石蜡切片,随后进行HE染色分析。3.大鼠咬肌组织切片免疫组化染色:采用链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物技术(streptavidin biotin-peroxidase complex method,SABC法)对各组大鼠咬肌组织切片进行NT-3、NGF的免疫组化染色,检测功能矫治联合颊车穴位中频电刺激作用于大鼠,对其咬肌组织中NT-3及NGF蛋白表达量的影响。4.NT-3 mRNA及NGF mRNA相对表达量检测:各组大鼠在进行相应处理后,在第3、7、14和21 d处死大鼠,取其左侧咬肌中段组织进行qPCR检测NT-3 mRNA、NGF mRNA的相对表达量,将3d空白对照组的mRNA表达量作为校准品,计算2-△△CT值,进行统计分析,检测功能矫治联合颊车穴位中频电刺激作用于大鼠,对其咬肌组织中NT-3mRNA及NGF mRNA相对表达量的影响。结果:1.成功建立功能矫治联合颊车穴位中频电刺激大鼠模型。2.大鼠咬肌组织切片HE染色结果:在第3d,各组咬肌组织切片中并未发现明显的细胞核数量及位置的差异;在第7d的条件对照组与实验组中出现了核内移现象,实验组细胞核数量明显增多,各组肌纤维数目基本稳定。在第14d,核内移现象在实验组更为突出。直至21d,条件对照组的核内移现象仍较为明显,而实验组的核内移现象减少。在条件对照组和实验组中,咬肌纤维并未出现断裂和退行性变。3.大鼠咬肌组织切片免疫组化染色结果:NT-3蛋白表达量的变化:同空白对照组相比较,条件对照组与实验组NT-3蛋白的表达量呈先升高后降低的趋势,且在第21d,条件对照组NT-3蛋白的表达量仍高于空白对照组,而实验组NT-3蛋白表达量在第21d已基本恢复至正常水平。NGF蛋白表达量的变化:同空白对照组相比较,实验组NGF蛋白的表达量在第7d出现显著增多,在第21d NGF蛋白的表达量与空白对照组相比未见明显差异;条件对照组中NGF蛋白的表达量在第14d才出现明显差异,且在第21d仍处于较高水平。4.qPCR检测结果:NT-3 mRNA相对表达量的变化:与空白对照组相比较,条件对照组在第14d出现NT-3 mRNA的相对表达量增加,在第21d NT-3 mRNA的相对表达量仍高于空白对照组;而实验组在第7d即出现NT-3 mRNA的表达增加,且于21d基本恢复至矫治前水平。NGF mRNA相对表达量的变化:与空白对照组相比较,实验组NGF mRNA的表达先升高后降低,而条件对照组在第14d出现NGF mRNA表达升高后,在第21d仍未出现表达降低的趋势。结论:功能矫治联合颊车穴位中频电刺激作用于大鼠咬肌,促使NT-3及NGF表达增多,可能通过促进突触成熟和运动神经元数量的增加,促使咬肌纤维类型的转换,从而加快功能矫治大鼠神经-肌肉改建的速率,缩短矫治时间。但将功能矫治联合颊车穴位中频电刺激应用于临床中的具体参数,还需要进一步研究。