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由条形柄锈菌(Puccinia striiformisf. sp.tritici)引起的小麦条锈病是小麦最重要的病害之一。该病害主要通过气流进行远距离传播,具有暴发成灾的特点,其发生流行常造成严重的小麦产量损失,甚至绝收,是严重影响中国小麦安全生产的重大生物灾害。目前种植抗病品种是防治条锈病最有效的措施,然而由于条锈菌易发生毒性变异,不断产生新地毒性小种,从而导致小麦品种的抗性在数年内迅速丧失,失去了利用价值。 早期研究表明,突变、异核(体细胞)重组和有性生殖均可导致毒性突变。尽管近些年随着小麦条锈菌转主寄主小檗的确定,发现了自然条件下我国小麦条锈菌可在野生小檗上完成有性生殖,然而有性生殖导致条锈菌毒性变异的研究尚未完全清楚,目前仅揭示了小麦条锈菌有性自交可导致其毒变异,而有性生殖中的条锈菌专化型间有性杂交对毒性变异的研究尚未报道。由于条形柄锈菌存在不同的寄主专化型,那么不同条锈菌专化型的转主寄主是否一样,是否能在同一寄主上进行有性生殖从而发生不同专化型间的有性杂交从而对小麦条锈菌毒性变异产生影响。为此,本研究开展了相关的研究,结果如下。 1.从采自甘肃平南披碱草上的条锈菌标样上分离得到的条形柄锈菌披碱草专化型(简称披碱草条锈菌)菌系。经病寄主专化型鉴定、原菌形态观察、分子测序,筛选确定得到条形柄锈菌披碱草专化型(Puccinia striiformisf.sp.elymi)。 2.确定小檗是披碱草条锈菌转主寄主,披碱草条锈菌是转主寄生的大循环锈菌。室内条件下,利用条锈菌披碱草专化型萌发的冬孢子产生的担孢子接种陕西小檗,接种后6-9d 在陕西小檗叶正面成功产生性子器(Pycnia),接种后 20d 左右在小檗叶背面成功产生锈子器(Aecia)。锈孢子接种披碱草与小麦铭贤 169,只侵染披碱草并产生夏孢子堆,表现为高反应型,但在小麦铭贤169上仅表现为坏死、褪绿,不产生夏孢子。验证陕西小檗是条锈菌披碱草专化型的转主寄主,与条形柄锈菌小麦专化型(简称小麦条锈菌)的转主寄主一致,陕西小檗是其共同转主寄主,是室内进行这两个条锈菌专化型有性杂交的生物学基础。 3.首次证实条锈菌专化型间有性杂交是导致小麦条锈菌毒性变异的新途径。成功在转主寄主小檗上进行了条形柄锈菌披碱草专化型与条形柄锈菌小麦专化型的有性杂交,获得了条锈菌有性生殖中专化型间杂交存在的证据,证实形柄锈菌披碱草专化型与条形柄锈菌小麦专化型导致小麦条锈菌毒性变异产生新小种。用条形柄锈菌披碱草专化型与条形柄锈菌小麦专化型萌发的冬孢子产生的担孢子分别接种陕西小檗(Berberis shensiana),产生性子器后以小麦条锈菌为母本,披碱草条锈菌为父本进行人工辅助有性杂交,锈子器产生后,成功从29个锈子腔分离获得杂交后代单锈孢菌系61个。选择基因型不同的61个后代菌系和亲本在27个单基因(Yr)系及92R137(Yr26)组成的鉴别寄主上进行毒性鉴定。结果表明有性杂交后代的61个菌系中,只有2个与母本条锈菌小麦专化型 CYR32 毒性一致,其余59个(占96.7%)的单锈孢菌系,共产生37个不同致病类型,证实条形柄锈菌小麦专化型与条形柄锈菌披碱草专化型有性杂交后代的毒性相比于母本小麦条锈菌发生高频率的变异,首次证明有性生殖中不同专化型间的杂交可导致小麦条锈菌毒性变异。 本研究通过条形柄锈菌披碱草专化型与条形柄锈菌小麦专化型进行有性杂交,揭示条形柄锈菌专化型间可以进行有性杂交,后代菌系毒性变异明显,变异频率高,是小麦条锈菌毒性变异的新途径。此结果为揭示我国小麦条锈菌毒性多样性的成因及制定小麦条锈病的防控新策略提供了重要的理论依据。