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研究背景和目的:microRNA(以下简写为miRNA),是一类非编码小分子RNA,在肿瘤的发生过程中起着十分重要的作用。本课题组前期研究发现在NGX6转染前后不同转移能力的结肠癌细胞株中miR-126的表达存在差异,提示miR-126可能与结肠癌转移有关;亦有研究表明,miR-126与胃癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌等恶性肿瘤密切相关。本研究将利用稳定表达miR-126的结肠癌细胞系研究miR-126的生物学功能,并初步验证数据库预测的靶基因,以期更深入探讨miR-126在结肠癌发生发展过程中发挥的作用,为结肠癌的诊断、治疗、预后提供新的靶点。方法:(1)利用慢病毒载体构建miR-126稳定过表达的结肠癌SW480细胞系。(2)研究miR-126过表达对结肠癌细胞的生物学功能影响,采用MTT法检测细胞增殖能力,划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力,流式细胞学技术检测细胞周期及凋亡(3)Targetscan及Pictar数据库预测miR-126靶基因有SPRED1、 PLK2、 CRK、 IRS1、 SLC7A5、 TOM1,验证miR-126对其表达的影响。结果:(1)稳定过表达miR-126的SW480细胞较对照组升高2.8倍(P<0.05)。(2)MTT实验结果显示,miR-126过表达组细胞生长活力在72、96小时较对照组显著降低。划痕实验及Transwell实验结果提示miR-126可抑制SW480细胞的迁移侵袭能力。流式细胞分析结果显示miR-126能够增加G1期细胞比例,减少S期细胞比例,抑制其增殖,同时能促进其凋亡。(3) real-time PCR结果表明IRS1、 SLC7A5、 TOM1在miR-126过表达组较对照组表达下降(P<0.05),SPRED1、 PLK2、 CRK在miR-126过表达组较对照组表达上升(P<0.05)。结论:(1)成功构建miR-126稳定过表达的结肠癌SW480细胞系。(2)miR-126可抑制结肠癌SW480细胞的增殖、迁移、侵袭能力并促进其凋亡。(3)在结肠癌中IRS1、 SLC7A5、 TOM1可能是miR-126调控的下游靶基因。