【摘 要】
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目的:建立3-脱氧葡萄糖醛酮(3-Deoxyglucosone,3-DG)诱导的3T3-L1前脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)细胞模型,并用于芹菜素等药物的干预研究。方法:(1)体外分离提取大鼠原代脂肪细胞,随
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目的:建立3-脱氧葡萄糖醛酮(3-Deoxyglucosone,3-DG)诱导的3T3-L1前脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)细胞模型,并用于芹菜素等药物的干预研究。方法:(1)体外分离提取大鼠原代脂肪细胞,随机分为3-DG组和对照组。不同浓度的3-DG作用48h后,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD法)测定细胞的葡萄糖消耗量。(2)体外培养3T3-L1前脂肪细胞,用不同浓度的3-DG作用后,以葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD法)测定培养液中残余的葡萄糖含量,观察3-DG对脂肪细胞糖消耗的影响,同时,通过western blotting技术观察3-DG对3T3-L1前脂肪细胞葡萄糖转运子(Glut4)蛋白表达及介导糖转运的胰岛素信号通路PI-3K/AKT途径的影响。(3)3-DG作用于3T3-L1前脂肪细胞的同时,培养基中分别加入芹菜素、柚皮素、葛根素,测定细胞葡萄糖消耗量,并探讨芹菜素改善3-DG诱导的脂肪细胞胰岛素抵抗的可能机制。结果:(1)3-DG使原代脂肪细胞的葡萄糖消耗量减少。(2)3-DG使3T3-L1前脂肪细胞的葡萄糖消耗量减少;同时,3-DG使3T3-L1前脂肪细胞Glut4蛋白表达下降;3-DG使3T3-L1前脂肪细胞中p85、Akt蛋白表达下降。(3)不同药物与3-DG同时作用于3T3-L1前脂肪细胞,可改善3-DG作用的3T3-L1前脂肪细胞葡萄糖消耗量。结论:3-DG可诱导3T3-L1前脂肪细胞产生胰岛素抵抗,这种细胞模型简便、可靠。芹菜素、柚皮素、葛根素可明显改善3-DG诱导的3T3-L1前脂肪细胞胰岛素抵抗效应。
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