论文部分内容阅读
第一部分标准化屋尘螨疫苗治疗儿童哮喘的临床研究目的了解标准化屋尘螨疫苗特异性免疫治疗(SIT)在我国哮喘儿童中的疗效和安全性,重点探索不同年龄段标准化屋尘螨疫苗的适宜维持量,以期获得更好的临床疗效,同时提高治疗的安全性。方法受试儿童均已确诊哮喘,入组时行屋尘螨皮肤试验,皮试指数++~++++,共计112例。分3组:5~<8岁SIT组(52例,予丹麦ALK-ABELLó公司的标准化屋尘螨疫苗SIT,维持剂量:70000 SQ-U)、8~14岁SIT组(52例,予丹麦ALK-ABELLó公司的标准化屋尘螨疫苗SIT,维持剂量:100000 SQ-U)、对照组(8例,仅予药物治疗),临床观察时间6mo。观察项目包括:基本药物评分、症状评分,基础肺功能,支气管激发试验,变应原的皮试指数和阳性项数(atopy数),SIT的副反应。观察方法:SIT前后,以哮喘日记方式记录每日药物、症状评分;用德国耶格公司MasterScope肺功能仪检测基础肺功能(指标:FEVl、PEF、V75、V50、V25占预计值的百分率)及乙酰甲胆碱的PC20变化;用13种标准化变应原皮肤点刺液:粉尘螨、屋尘螨、热带螨、狗毛、猫毛、德国小蠊、美洲大蠊、霉菌Ⅰ、艾蒿、霉菌Ⅵ、豚草、花粉Ⅳ、花粉Ⅰ,和阳性对照液组胺(10mg/ml)、阴性对照液生理盐水(丹麦ALK-ABELLó公司提供)检测变应原的皮试指数和atopy数变化;由医生记录SIT的不良反应。结果治疗6mo后,5~<8岁SIT组和8~14岁SIT组FEV1、PEF、V75占预计值的百分率及乙酰甲胆碱PC20均显著提高(均P<0.01),2组间两两比较无显著差异;而对照组仅PEF占预计值的百分比才有显著提高(P<0.01),PC20虽有升高,但无统计学意义。5~<8岁SIT组和8~14岁SIT组屋尘螨皮试指数与其他10种变应原皮试指数及atopy数均显著降低(均P<0.01),2组间两两比较差异无显著性。此外,5~<8岁SIT组粉尘螨皮试指数也明显降低(P<0.05);8~14岁SIT组热带螨的皮试指数也显著降低(P<0.01)。对照组13种变应原的皮试指数及其他10种变应原atopy数均无明显变化。8~14岁SIT组局部反应次数显著高于5~<8岁SIT组(P<0.01),全身反应发生率无显著差异。治疗6mo后,3组哮喘儿童药物、症状评分均明显减少(均P<0.05),且治疗各阶段3组间两两比较无显著差异。结论70000SQ-U和100000SQ-U的标准化屋尘螨疫苗作为维持量SIT 5~<8岁与8~14岁哮喘儿童,6 mo后都可减少哮喘症状、药物评分,降低屋尘螨和其他10种变应原的皮肤指数及其他10种变应原的atopy数,改善基础肺功能,降低气道高反应性,且70000SQ-U治疗组可明显降低局部反应的发生率。这提示70000SQ-U和100000SQ-U的标准化屋尘螨疫苗可分别作为5~<8岁与8~14岁哮喘儿童SIT的适宜维持量。第二部分标准化屋尘螨疫苗治疗儿童哮喘的机理研究目的探讨标准化屋尘螨疫苗SIT对哮喘儿童外周血中CD4+CD25+ T百分率, PBMCs增殖反应和分泌IL-4、IL-10、IFN-γ的影响。以进一步阐明标准化屋尘螨疫苗SIT哮喘的作用机理。方法受试对象入组标准,治疗方案同前。治疗前后,用FACS Calibur流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+ T的百分率,用ELISA法检测PBMCs培养上清液IL-4、IL-10、IFN-γ表达水平,用MTT法检测PBMCs增殖反应。结果治疗6mo后,5~<8岁组与8~14岁组IL-4明显降低(均P<0.05);IL-10也显著降低(分别P<0.01,P<0.05);IFN-γ均无显著变化。对照组IL-4明显降低(P<0.05),IFN-γ无显著变化。SIT组CD4+CD25+T/CD4+CD25-T百分率明显降低( P<0.05 );对照组CD4+CD25+T/CD4+CD25-T百分率无明显变化。SIT组和对照组CD4+CD25+T均无明显变化。5~<8岁SIT组和8~14岁SIT组PBMCs增殖反应无显著变化,对照组PBMCs增殖反应明显降低(P<0.05)。结论标准化屋尘螨疫苗SIT可通过抑制Th2型细胞因子的分泌来发挥其免疫治疗作用。