EB病毒的潜伏感染及其编码的癌基因的表达与鼻咽恶性淋巴瘤细胞增殖和凋亡关系的初步研究

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目的 本研究主要探讨在鼻咽恶性淋巴瘤患者中EB病毒的感染情况,以及在EB病毒潜伏感染状态下编码的病毒癌基因产物LMP-1,与鼻咽部发生恶性淋巴瘤的关系。由于恶性淋巴瘤与其它恶性肿瘤一样,均是细胞的增殖过程和凋亡过程不能保持平衡状态,细胞逐渐发生恶性增生且“永生化”,从而形成肿瘤。因此我们分别从淋巴瘤的增殖和凋亡两方面综合研究,初步揭示出鼻咽恶性淋巴瘤的发生、发展过程。 方法 我们选用EBER-1/2 mRNA探针,经原位杂交方法检测了70例鼻咽恶性淋巴瘤和10例鼻咽慢性炎症病例中的EB病毒感染,同时使用免疫组化染色方法,分别标记了CD20、CD45RO、CD56、LMP-1、PCNA、CyclinD1、Bcl-2、Fas、FasL阳性细胞,用以分析这些指标的相互关系及在鼻咽淋巴瘤的发生、发展中的作用。此外,我们还采用原位末端标记DNA片段技术,对鼻咽淋巴瘤组织中的凋亡细胞进行定量计数观察。 结果 EB病毒在鼻咽恶性淋巴瘤患者中的阳性表达率(62.9%)明显高于慢性炎症患者(0%),类似地LMP-1蛋白在上述二者间也有差异表达,肿瘤组(68.6%)高于炎症组(20%)(P=0.003)。本组有12例NK/T细胞淋巴瘤,特征性表达CD56,与LMP-1相关,但不具有特殊的生物学行为。另外,一些有关描述增殖、凋亡过程的指标:Cyclin D1、增殖指数、Bcl-2、Fas、FasL、凋亡指数在淋巴瘤组织和慢性炎症组织中的阳性表达之间也均存在着显著性差异。LMP-1阳性高表达率除与鼻咽淋巴瘤患者出现临床B症状相关(P=0.043)外,与临床分期、出现区域淋巴结肿大均不相关,但LMP-1的表达与病人的预后密切相关,在死亡病人组中有LMP-1的高表达。同时研究还发现,这些增殖、凋亡指标均与LMP-1阳性表达无天津医科大学硕士研究生学位论文关,而在这些指标的相关分析中,只有 Cyclin DI 和增殖指数间存在正相关 (P=0.001)。在进行不同病理类型的淋巴瘤的分析中,显示 BC12蛋白在 B细胞淋巴瘤中的表达和在NIQT、外周T细胞淋巴瘤中的表达存在差异,阳性表达水平前者高于后二者,而 CyClin DI蛋白在 N肌细胞淋巴瘤中的表达高于在外周 T。B细胞淋巳瘤中的表达。生存分析结果显示:病人的发病年龄、区域淋巴结肿大。给予的治疗方式、首程疗效以及Fas蛋白的阳性表达水平都是诀定病人预后的重要指标。结论 在鼻咽恶性淋巳瘤的发生、发展过程中,EB病毒的感染及其编码的癌蛋白LMP刁的产生起到了致关重要的作用,此外,LMP-1与不良的临床特征和预后相关,同时还与CD56+的NK/T细胞淋巳瘤相关。通过对一系列增殖、凋亡指标的分析,发现它们均在肿瘤细胞中有异常表达,从而肯定了它们在淋巴瘤的发病中的作用,但研究却发现这些指标均与LW刁蛋白表达不相关,提示出:对于鼻咽恶性淋巳瘤的发病启动信号的传导是一个复杂的网络系统,作为癌基因的LMP刁不是直接作用于那些调控增殖、凋亡的蛋白分子,而是通过激活不同的信号传导通路,间接调控,从而共同促进肿瘤的形成c
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