【摘 要】
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TGF-β1/Smads信号通路异常与肿瘤的发生、发展、肿瘤细胞的浸润及转移密切相关.该文主要探讨了TGF-β1/Smads信号通路在卵巢癌细胞中生长抑制作用的机制及TGF-β1在卵巢癌转
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TGF-β1/Smads信号通路异常与肿瘤的发生、发展、肿瘤细胞的浸润及转移密切相关.该文主要探讨了TGF-β1/Smads信号通路在卵巢癌细胞中生长抑制作用的机制及TGF-β1在卵巢癌转移中的作用.该研究采用MTT和流式细胞检测等方法研究了TGF-β1对卵巢癌细胞系HO-8910、HO-8910PM及SKOV3的生长抑制作用;并应用RT-PCR、荧光免疫组化等方法研究了TGF-β1/Smads传导通路中各组分的表达和定位,结果显示,TGF-β1能够抑制HO-8910、HO-8910PM细胞的增殖,对SKOV3细胞没有生长抑制作用,而3种卵巢癌细胞均表达了TGF-β1信号通路中的所有已知组分;应用RT-PCR和荧光免疫组化检测了TGF-β1刺激前后Smad7和P-Smad2定位及表达的变化,结果表明3种卵巢癌细胞在TGF-β1刺激后Smad7 mRNA瞬时表达增加,Smad7蛋白表达亦增加并由胞核转位到胞浆,P-Smad2由胞浆转位到胞核.通过mRNA array方法比较分析了HO-8910和SKOV3细胞分别在TGF-β1刺激2h后TGF-β/BMP传导通路相关基因表达差异,结果表明SKOV3细胞中TGF-β1不能下调c-myc的表达,也不能上调p15的表达,应用RT-PCR和Western Blot方法验证了此结果.应用RT-PCR、Western Blot和明胶酶实验等方法检测了HO-8910和HO-8910PM细胞中TGF-β1对MMP-2、MMP-9表达及分泌的调节作用,结果显示TGF-β1主要上调了低转移细胞系HO-8910中MMP-2和MMP-9的表达和分泌.通过免疫组化方法检测了121例标本包括31例正常卵巢组织、45例卵巢癌卵巢原发灶组织和45例卵巢癌转移灶中TGF-β1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达,结果表明卵巢癌原发灶组织中MMP-2的表达高于正常卵巢组织(p<0.05);TGF-β1、MMP-2和MMP-9在卵巢癌转移灶中的表达均明显高于原发灶(p<0.01);且TGF-β1与MMP-2和MMP-9的表达均存在相关性(p<0.05).以上研究结果表明,TGF-β1/Smads信号通路在卵巢癌细胞系中是完整的、有功能的;TGF-β1不能下调c-myc的表达是SKOV3细胞耐受TGF-β1介导的生长抑制作用的主要机制;卵巢癌中TGF-β1主要通过上调MMP-2和MMP-9的表达和分泌而促进卵巢癌的转移.
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