一株抗高浓度葡萄糖阻遏的纤维素酶高产真菌Trichoderma pseudokoningii UVⅢ:诱变选育及固体培养研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wahuhihi
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从该室保存的一株纤维素酶产量较高的拟康氏木霉(在含0.6%葡萄糖的纤维素双层平板上即不产水解圈)为出发菌株,经过一系列规诱变方法处理并结合含梯葡萄糖的纤维素双层平板法选育,在含4%葡萄糖的纤维素双层平板上获得一株在葡萄糖浓度达8%仍能产生纤维素水解透明圈的突变株UVⅢ.不加阻遏物固体培养5d时,CMC酶活、FPA酶活和βG酶活分别达669.6 IU/g干曲、40.9IU/g干曲和13.7 IU/g干曲,是相同条件下出发株最高CMC酶活时(4d)的1.34倍、2.14倍和10.5倍,是目前较高的纤维素酶产生株.且UVⅢ在培养基中还原糖水平较高时也可产纤维素酶,反映出它与出发株相比对还原糖有更强的抗阻遏能力.采用正交设计结合单因子设计的方法,得到突变株的最佳固体发酵条件为:60%麸皮加40%玉米皮(或反之);NH<,4>NO<,3> 1.2%;NaH<,2>PO<,4> 1.3%;加水量与干料比1:1;30℃培养.此时,CMC酶活可达1100IU/g曲,比未经优化的提高了68%,是出发株的2.25倍;FPA和βG分别可达55.6IU/g曲和24IU/g曲,提高了26%和60%,分别是出发株相应最高酶活的2.9和13.3倍.添加剂的加入对各酶组分都有影响但各不相同.牛肉膏、蛋白胨和Triton X-100的加入有助于CMC类酶的产生,分别可提高CMC 5.2%和10.5%,但是Triton X-100明显抑制FPA和βG的产生,使分别降低28.6%和24.4%.FPA除受Triton X-100抑制(降28.6%)外,基本上不受其它添加剂的影响.适量的V<,B>可提高32.3%的βG产量.
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