皮肤作为人体中最大的器官,不但保护着我们正常的新陈代谢,而且在防紫外辐射,病原微生物侵害,异物入侵和其他有害的环境因素方面也起着关键作用。然而外部创伤常导致组织坏死并破坏皮肤的防御功能,使组织液渗出、水电解质平衡紊乱和伤口感染发生,甚至进一步恶化危害患者生命。本课题根据理想伤口敷料的特点,应用丝素蛋白与纳米银颗粒相结合,制备出一种利于伤口愈合的创口敷料—载银冻干海绵。主要研究内容与结论如下:利用碱液加热法脱去天然蚕丝中的丝胶蛋白,再经过洗涤-烘干-溶解-透析-离心等步骤后,获得纯化的丝素蛋白水溶液。将定量的硝酸银粉末与定量的丝素蛋白水溶液混合,置于紫外灯下照射原位形成分散均匀的丝素蛋白-纳米银混合体系;经过预冷冻-冻干-甲醇浸泡-洗涤干燥后,得到载银冻干海绵。对此敷料的蛋白质分子量与二级结构、微观表面形貌、吸水性、力学性能、生物降解性、抗菌能力、细胞相容性和促受损皮肤愈合等特性进行表征与评价。结果表明:丝素蛋白分子量的大小由脱胶时长决定,脱胶时间愈长分子量愈低,反之亦然。甲醇浸泡处理,可有效增加冻干海绵内β-折叠的含量,其含量可从17.32%(处理前)增长至39.41%(处理后)。冻干海绵的力学性能随丝素蛋白浓度和β-折叠含量的增加而增强,其最终拉伸强度可从38.33±2.89kPa(甲醇处理前,3%wt/v)增长至180.00±18.03kPa(甲醇处理后,6%wt/v);同时β-折叠含量的增加能够极大程度降低其体外降解速率。扫描电镜结果显示,冻干海绵内部呈现多孔的网状结构,保证了其强吸水性,吸水性结果表明,该伤口敷料能够吸收6倍于自身重量的水溶液。在本研究中,大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌被用于表征其抗菌能力;NIH3T3成纤维细胞被用于表征其细胞相容性;小鼠全层皮损愈合模型被用于表征其伤口修复能力。细菌悬浊液实验与平板抗菌圈结果表明,该载银冻干海绵对大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌均表现出较强的抑制效果,并随载银量的增加而增强。载银冻干海绵浸提液细胞存活率实验与直接接触法实验表明,该敷料的细胞相容性良好。小鼠背部伤口愈合结果与组织切片染色结果表明,该载银冻干海绵能够有效加快创口组织再生,促进伤口愈合。综上,本研究基于丝素蛋白,利用紫外照射原位制备纳米银技术与冻干法制备多孔海绵技术,使纳米银成功被整合至冻干海绵内,制备出具有良好细胞相容性、抗菌性、力学性能和生物降解性的伤口敷料,并对该敷料的各种性能进了研究与探讨,为伤口的治疗提供了新方法与新思路。