【摘 要】
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目的:通过实验观察脑缺血再灌注大鼠缺血脑组织内VGLUT1和PSD-95蛋白及Ca M/Ca MKⅡ信号通路的表达情况,分析电针对脑缺血再灌注后神经轴突再生的影响,进而探讨电针对脑缺血后神经轴突再生的机制,为临床上电针治疗脑缺血再灌注提供科学的实验依据。材料与方法:55只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法,随机分为假手术组（n=10）和手术组（n=45）。手术组采用改良的线栓法制备大脑中动脉栓塞（
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目的:通过实验观察脑缺血再灌注大鼠缺血脑组织内VGLUT1和PSD-95蛋白及Ca M/Ca MKⅡ信号通路的表达情况,分析电针对脑缺血再灌注后神经轴突再生的影响,进而探讨电针对脑缺血后神经轴突再生的机制,为临床上电针治疗脑缺血再灌注提供科学的实验依据。材料与方法:55只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法,随机分为假手术组（n=10）和手术组（n=45）。手术组采用改良的线栓法制备大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型大鼠,缺血2h后取出线栓进行再灌注。依据Longa5级神经功能评分标准,将评分介于1-3分之间的24只大鼠随机分为模型组12只和电针组12只,排除术后7天内死亡11只,最终纳入模型组（n=6）、电针组（n=7）。选取“百会”“印堂”及双侧“足三里”穴对电针组大鼠进行治疗（4Hz/20Hz,15min,1次/1d）,连续治疗7d。通过Morris水迷宫实验完成对大鼠的学习和记忆能力检测;HE染色法观察各组大鼠脑组织的形态学改变;免疫组化法检测各组大鼠脑缺血组织内VGLUT1和PSD-95表达水平;ELISA法检测各组大鼠脑缺血组织内Ca M、Ca MKⅡ表达水平;Western Blot法检测各组大鼠脑缺血组织内p-Ca MKⅡ表达情况。结果:1.神经功能评分结果:评分显示,模型组大鼠神经功能评分较假手术组显著升高（P＜0.01）;经电针治疗后,电针组大鼠神经功能评分较模型组显著降低（P＜0.05）。2.Morris水迷宫实验:与假手术组相比,模型组大鼠穿过逃生平台的次数明显减少（P＜0.01）,其逃避潜伏期明显升高（P＜0.05）;与模型组相比,电针组大鼠穿过逃生平台的次数明显增多（P＜0.01）,其逃避潜伏期明显缩短（P＜0.05）。3.HE染色结果:假手术组细胞核清晰,细胞间隙致密;模型组大鼠脑组织细胞结构严重破坏,神经细胞变性、萎缩、坏死,细胞间隙疏松;电针组大鼠脑组织细胞形态结构紊乱的状态有所改善,细胞核较为清晰。4.免疫组化结果:VGLUT1和PSD-95阳性细胞数被标记为棕色呈颗粒状。与假手术组相比,模型组和电针组大鼠脑缺血组织内VGLUT1和PSD-95阳性细胞数均明显减少（P＜0.05）;与模型组比较,电针组大鼠脑缺血组织内VGLUT1和PSD-95阳性细胞数均明显增多（P＜0.05）。5.ELISA结果:与假手术组比较,模型组和电针组大鼠脑缺血组织内Ca M、Ca MKⅡ表达水平均显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,电针组大鼠脑缺血组织内Ca M、Ca MKⅡ表达水平均明显降低（P＜0.05）。6.Western Blot结果:与假手术组相比,模型组和电针组大鼠脑缺血组织中p-Ca MKⅡ表达水平显著升高（P＜0.05）;与模型组相比,电针组大鼠脑缺血组织中p-Ca MKⅡ表达水平显著降低（P＜0.05）。结论:1.通过对大鼠“百会”“印堂”及双侧“足三里”穴进行电针治疗,可降低脑缺血再灌注模型大鼠的神经功能评分。2.通过对大鼠“百会”“印堂”及双侧“足三里”穴进行电针治疗,可促进脑缺血再灌注模型大鼠神经行为学和学习记忆功能的恢复。3.通过对大鼠“百会”“印堂”及双侧“足三里”穴进行电针治疗,可上调脑缺血再灌注大鼠缺血脑组织内VGLUT1和PSD-95表达量,增强中枢神经系统突触传递效能,促进神经轴突再生,改善学习记忆等认知功能。4.通过对大鼠“百会”“印堂”及双侧“足三里”穴进行电针治疗,能够抑制Ca M/Ca MKⅡ信号通路的过度活化,对脑组织产生一定的保护作用。
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