土壤盐渍化已成为限制林木生长发育的重要因素之一，基因工程技术通过将外源基因导入细胞并整合到林木基因组中，能够提高林木耐盐性。植物耐盐相关转录因子可通过调控下游抗逆基因的表达，显著提高植物耐盐的能力，通过对转录因子胁迫响应和调控机制的研究，可为林木耐盐育种工作提供理论和试验依据。本研究克隆得到来自欧洲黑杨（Populus nigraL.）的转录因子PnHB7基因并对其进行生物信息学分析，获得PnHB7基因及HD-Zip家族主要组成结构信息;运用基因工程技术，构建了遗传转化载体;通过农杆菌介导的遗传转化，获得烟草转基因植株，并对转基因植株进行耐盐性测定、启动子胁迫响应、亚细胞定位、转录组测序，获得PnHB7基因的表达位置、耐盐特性、胁迫响应和调控通路的预测信息。主要结果如下:
　　(1)杨树HD-Zip家族由63个转录因子组成，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四个亚族，分别包含22个、17个、8个和16个转录因子;PnHB7转录因子属于杨树HD-Zip家族Ⅰ亚族，含有同源结构域(HD)和亮氨酸拉链结构(LZ);该基因位于杨树14号染色体上，全长717bp，编码238个氨基酸的多肽链，分子式为C1185H1861N329O387S8，分子量为27165.26Da，蛋白中不存在信号肽;上游启动子区域含多个与胁迫响应相关的顺式作用元件。
　　(2)将PnHB7基因分别构建在pBI121和pCAMBIA1302质粒上，PnHB7基因的上游启动子区域1020bp的序列构建在pBI121质粒上，PCR和酶切检测后，得到PnHB7基因的过表达载体、PnHB7∶GFP融合表达载体和PnHB7基因的启动子载体;利用农杆菌介导法对野生型烟草进行遗传转化，经过卡那霉素筛选后得到转基因株系;将转基因烟草幼苗移植到温室中，提取DNA和RNA反转录成cDNA后进行PCR检测，可得到明亮、单一的目的条带，确认得到过表达烟草株系4个，启动子转化烟草株系3个。
　　(3)以空载GFP作为对照，将GFP融合表达载体瞬时转化野生型烟草进行PnHB7基因的亚细胞定位，定位结果显示PnHB7∶GFP融合蛋白定位于细胞核。
　　(4)转基因烟草盆栽苗耐盐性测定结果表明，0.4％和0.8％NaCl处理下，过表达烟草生长及生理指标均优于野生型烟草。NaCl处理下，转基因植株的地径、生物量、脱落酸含量、脯氨酸含量的平均值均高于野生型烟草，转基因植株的丙二醛含量、相对电导率、叶绿素a和叶绿素总量下降率的平均值均低于野生型烟草;荧光参数也优于野生型烟草，具更高的光合利用率和光保护机制，表明过表达烟草具有更强的耐盐性。
　　(5)PnHB7启动子转化烟草幼苗的胁迫响应试验结果表明，烟草幼苗在2mg·L-1的脱落酸水溶液、150mg·L-1乙烯利PBST溶液、15mg·L-1的茉莉酸甲酯水溶液、0.4％的NaCl水溶液中处理30min后，可被GUS染液染蓝，表明PnHB7基因能够响应脱落酸、乙烯利、茉莉酸甲酯和氯化钠(NaCl)胁迫。
　　(6)转基因烟草的转录组测序结果显示，激素相关蛋白基因（脱落酸、赤霉素、乙烯、水杨酸）、氧化酶类基因（氧化酶、过氧化物酶、多酚氧化酶）、转录因子蛋白基因（MYB类、WRKY、AP2、HD-Zip）等多个与抗逆相关基因显著上调表达，且多个基因位于ABA转导的信号通路上，推测PnHB7基因在ABA调控通路上发挥作用。