中国是世界上兔子数量最多的国家之一。兔子养殖过程中存在多种疾病,其中断奶幼兔腹泻是兔场最常见疾病,使用抗生素治疗是最常规的处理方法。近年来,世界各国都在推进饲料“禁抗”,因此寻求安全有效的抗生素替代品迫在眉睫。研究发现部分乳酸菌能抵抗外来致病菌的定植,在防治动物腹泻、促进动物生长、提高免疫机能等方面效果显著,能有效降低幼龄动物的发病率和死亡率。但具有自主知识产权的菌株较少,市场上多为国外产品。因此,本试验旨在筛选出具有抗腹泻功能的乳酸菌,并探究其在预防宠物兔腹泻上的应用,为开发相关的产品提供菌株和理论依据。本试验采集53份兔粪便样本进行乳酸菌分离,采用体外抑菌法筛选出可以预防兔腹泻的乳酸菌。对分离得到的菌株进行16S r DNA鉴定,评价其酸和胆盐的耐受性、抗生素敏感性、表面疏水性及自凝集性等益生特性。最后将筛选的菌株饲喂断奶新西兰幼兔,21天后饲喂幼兔四种肠道致病菌,通过对幼兔腹泻发生率、生长性能、血清抗体、血液生化、血液炎症、十二指肠组织切片、短链脂肪酸及盲肠内菌群变化等指标探究菌株对兔腹泻的预防作用。主要研究结果如下:1.2016年～2020年杭州地区兔疾病流行病学调查:浙江大学教学动物医院就诊宠物兔244例,33.46%因消化系统疾病就诊,患病前期出现肠炎、胀气、菌群紊乱、胃肠迟缓等症状,后期发展为腹泻。2.抗兔腹泻乳酸菌的筛选:从53份粪便样本中筛选出97株乳酸菌疑似菌株,其中乳酸菌ZJUIDS-R1和ZJUIDS-R2抗菌效果最好。ZJUIDS-R1对革兰氏阴性菌（大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌）抑制效果较好,抑菌圈直径均大于15 mm;而ZJUIDS-R2对大肠杆菌和单核细胞增生李斯特菌抑制效果较好,抑菌圈直径均大于12 mm。经16S r DNA鉴定,确定ZJUIDS-R1为屎肠球菌和ZJUIDS-R2为动物联合乳杆菌。3.菌株益生特性评定:ZJUIDS-R1和ZJUIDS-R2由单菌落培养8 h后进入对数生长期,生长14 h后进入平台期;在p H=1.5的环境中培养3个小时后存活率均大于20%,在0.3%胆盐的培养基中存活率分别为10%和0.9%,疏水作用力分别为51.63%和29.83%,自凝集率在24 h后分别达到50.71%和69.11%,且对青霉素、四环素、复方新诺明等常见抗生素敏感。4.乳酸菌预防兔腹泻功能评价:屎肠球菌ZJUIDS-R1和动物联合乳杆菌ZJUIDS-R2及二者联合用药可以降低断奶幼兔的腹泻率,其中动物联合乳杆菌ZJUIDS-R2因良好的免疫调节作用效果最好。两株菌可以显著增加免疫器官脾脏重量,对其他生长性能无显著影响;能够显著降低全身炎症反应,提高血液内抗体浓度;显著提高断奶幼兔十二指肠VH和V/C,降低CL;改变盲肠内菌群丰度。抗腹泻的机理可能与屎肠球菌ZJUIDS-R1和动物联合乳杆菌ZJUIDS-R2能够刺激宿主免疫反应清除病原体,增加肠道内菌群丰度,维持肠道菌群平衡等方面有关。综上所述,本研究从兔粪便中共筛选得到一株屎肠球菌ZJUIDS-R1和一株动物联合乳杆菌ZJUIDS-R2,这两株菌具有较好的体外抑菌作用、益生特性和安全性。这两株菌能够降低断奶幼兔腹泻发生率,主要通过显著提高宿主免疫能力,增加盲肠内菌群丰度发挥效果。两株菌具有替代抗生素的潜在作用,具有良好的临床应用前景和商业价值。