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许氏平鲉（Sebastes schlegelii）主要生活在西北太平洋近海岛礁区域,是我国重要的海水养殖鱼类。然而,海水污染和病害爆发等问题造成许氏平鲉产量下降。本文以许氏平鲉为实验对象,研究了许氏平鲉外周血细胞的形态学和细胞化学特性,探究了柴油水溶性物（WSD）对许氏平鲉血清生化指标、组织学、免疫相关基因的影响,明晰了副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus）感染对许氏平鲉血液学指标以及免疫相关基因应答和脾脏转录组的影响。以期通过本研究,为许氏平鲉的健康评估和和疾病诊断提供基础数据,为许氏平鲉免疫相关研究打下基础。主要研究内容及结果如下:1.许氏平鲉外周血细胞形态学和细胞化学特征。通过常规Wright-Giemsa染色、透射电镜（TEM）和多种细胞化学染色（过碘酸雪夫PAS?苏丹黑B SBB?酸性磷酸酶ACP?碱性磷酸酶ALP?过氧化物酶POX和α-乙酸萘酚酯酶NAE）方法,对许氏平鲉外周血细胞的形态学、形态计量学以及细胞化学特性进行研究。研究结果显示,许氏平鲉外周血中可区分出红细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和血栓细胞。外周血中红细胞数量最多;淋巴细胞是白细胞中数量最多的细胞,其次是嗜中性粒细胞和单核细胞。单核细胞体积最大,大小为（11.08±1.14）μm×（10.06±1.32）μm。许氏平鲉的成熟红细胞呈卵形,边缘光滑,细胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞中心;单核细胞呈圆形,边缘不均匀,细胞核位于细胞一侧或中部;淋巴细胞通常为圆形,细胞质较少;嗜中性粒细胞的细胞核很小,通常位于细胞的一侧,形状不规则,如长椭圆形、杆形或分叶;血栓细胞有多种形态,多数为圆形或杆形。TEM观察发现,红细胞中具有线粒体和高尔基复合体;单核细胞和嗜中性粒细胞拥有空泡和内质网,此外,嗜中性粒细胞还含有特殊颗粒;淋巴细胞和血栓细胞只观察到线粒体,其他的细胞器很少观察到。红细胞和血栓细胞6种细胞化学反应全部阴性;单核细胞呈PAS和ACP强阳性,SBB、ALP和POX阳性。嗜中性粒细胞除ACP阳性外,细胞化学染色结果与单核细胞的相同;淋巴细胞呈PAS和ALP阳性,SBB、ACP、POX和NAE阴性,也可观察到呈PAS阴性的淋巴细胞。2.柴油水溶性物对许氏平鲉血清生化指标、组织学及免疫相关表基因的影响。许氏平鲉暴露在WSD后,研究结果显示部分血清生化指标存在较大差异,碱性磷酸酶降低3.54倍,葡萄糖降低3.12倍,球蛋白降低1.58倍,然而K+浓度升高3.55倍。肝脏和鳃的HE染色结果显示,肝组织间充血,次级鳃小片尖端畸形、上皮隆起,初级鳃小片增生,形成动脉瘤。组织切片测量结果发现,许氏平鲉暴露在WSD后,次级鳃小片的长度显著缩短（P＜0.05）;鳃组织的AB-PAS染色发现3种不同类型的黏液细胞,许氏平鲉暴露在WSD中后,鳃组织中的3种黏液细胞的数量均显著增加（P＜0.05）。此外,肝脏中11种免疫相关基因m RNA相对表达量表达结果表明,与LPS刺激组相比,WSD暴露LPS刺激组IL-1β、IL-8、TNF receptor、BAFF、C1s、C1r、My D88相对表达量显著高于LPS刺激组（P＜0.05）,Caspase 10的相对表达量显著低于LPS刺激组（P＜0.05）,而IL-1,TNFα,C1inh的相对表达量在两个处理组间无显著差异（P＞0.05）。3.许氏平鲉感染副溶血性弧菌早期的血液学、组织学变化和免疫反应。本研究发现,在副溶血性弧菌感染期间,常见充血、出血和腹水,还可见肝脏炎症、变性和坏死。感染后肠上皮黏膜完整性、表皮厚度、绒毛高度和黏液细胞数量减少。对照组和实验组之间大多数血液学参数存在明显差异,例如,开始溶血的Na Cl浓度和红细胞体积显着降低（P＜0.01）;白细胞计数（WBC）、溶菌酶（LZM）、丙二醛（MDA）、K+、Cl-和Ca2+显着增加（P＜0.01）。此外,4个组织（鳃、肝脏、血液和脾脏）中的11个免疫相关基因m RNA表达结果表明,C1r、C1s和C1inh的表达在组织间差异很大。感染后4种组织中的Caspase10表达降低,但My D88、TNF receptor、TNFα、BAFF、IL-1β、IL-8和IL-10在感染后24h表达量增加。特别是,肝脏和脾脏中IL-1β的表达在6 hpi分别增加了123.67和104.94倍。4.副溶血性弧菌感染许氏平鲉后的脾脏转录组分析。lllumina测序法查明感染副溶血性弧菌的许氏平鲉脾脏转录组反应。从头组装产生了114,260条Unigenes,长度从301到32,331 bp,平均长度为1,094 bp。基因本体注释总共为注释的转录组分配了25,999个术语,其中52.47%来自Biological process;22.77%来自Molecular function;24.76%来自Cellular component。在与0 hpi组相比,12 hpi、48 hpi、72 hpi、96 hpi差异基因数量分别为1,826个（1,276个上调,550个下调）1,196个（827个上调,369个下调）、532个（414个上调,118个下调）、701个（547个上调,154个下调）。差异表达基因主要参与Toll-like receptor（TLR）和NOD-like receptor（NLR）,RNA传感器RIG-I-like receptor（RLR）以及细胞质核酸感受器Cytosolic DNA sensors（CDS）。该论文有图20幅,表10个,参考文献206篇。