【摘 要】
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目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)信号在成纤维细胞促血管生成中发挥的作用。方法:ELISA检测Hepa1-6细胞上清液TGF-β1的含量;将分离得到的胎鼠成纤维细胞培养至第三代后
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目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)信号在成纤维细胞促血管生成中发挥的作用。方法:ELISA检测Hepa1-6细胞上清液TGF-β1的含量;将分离得到的胎鼠成纤维细胞培养至第三代后分为3组,分别用普通培养液(DMEM/F12组)、含等量Hepa1-6细胞上清液的条件培养液(Hepa1-6组)以及加入1uM TGF-β1受体抑制剂(GW788388)的条件培养液(GWHepa1-6组)培养;采用qPCR、免疫荧光双染法检测培养的成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管内皮生长因子A(VEGFA)的mRNA及蛋白质表达水平;采用基质胶(Matrigel)血管形成实验检测成纤维细胞上清液作用下EA.hy 926细胞成管能力。结果:与DMEM/F12相比,Hepa1-6细胞上清液中TGF-β1的含量明显升高(P<0.01);与DMEM/F12组和GWHepa1-6组比较,Hepa1-6组成纤维细胞中α-SMA mRNA和蛋白质相对水平明显增加(P<0.01),同时VEGFA mRNA和蛋白质相对水平也明显增加(P<0.01),且两者在第5天时达最高,其上清液诱导EA.hy 926形成小管能力明显增强(P<0.01)。结论:TGF-β1信号通路可以诱导成纤维细胞中α-SMA和VEGFA的表达,进而促进EA.hy 926细胞形成小管样结构,证明TGF-β1信号在成纤维细胞促血管生成中发挥重要作用。
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