松乳菇菌丝分离培养及其多糖药理活性的初步研究

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本文以野生松乳菇子实体为材料,进行分离培养,对分离到的菌种进行生长特性、菌丝多糖提取及其药理活性初步研究,具体工作及结论如下:(1)松乳菇菌种的分离培养及生长特性研究取松乳菇的不同部位进行菌种分离,分离到8株菌,其中从叶柄间分离到的菌丝生长最快,同时筛选出适合松乳菇菌丝生长的培养基,使松乳菇分离成功率达到70%;用不同固体平板培养研究其人工培养特性发现:葡萄糖为最佳碳源;乙酸铵为最佳氮源;测定了不同培养基的最适PH值。(2)三种方法提取松乳菇菌丝胞内多糖①利用微波破壁技术提取松乳菇胞内多糖,采用单因素试验结果表明:浸提时间在120S~180S、料液比1.0:2000~3000、乙醇浓度在15%~25%时,松乳菇胞内多糖提取率均最高;②复合酶破壁技术提取松乳菇胞内多糖,单因素试验结果表明:料、液、复合酶(纤维素酶:果胶酶)比为100:50000:1.5(1:2),浸提PH值5.0、浸提温度50℃,松乳菇胞内多糖提取率达到最高;③利用超声破壁提取松乳菇菌丝多糖,通过正交实验和单因素实验对提取工艺进行了研究,确定了最佳工艺条件:菌丝体粒度为60目,料液比1:2500,超声温度控制在60℃,超声功率为400W,超声时间60分钟。(3)松乳菇菌丝体多糖药理活性方面的初步研究①测定了松乳菇菌丝体胞内多糖与胞外多糖对常见5种病源菌(大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、链球菌、巴氏杆菌)的体外抑菌效果,并得出了多糖的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);②考察松乳菇菌丝体胞内多糖与胞外多糖在鸡胚水平上对法氏囊病毒和新城疫病毒作用效果:从试验得出松乳菌胞外多糖对法氏囊病毒和新城疫病毒基本上没有作用,而松乳菌胞内多糖对法氏囊病毒和新城疫有一定的抑制作用。
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