卵巢癌A2780细胞特异性结合肽的筛选及鉴定

来源 :南华大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:forbook121
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:利用噬菌体体内展示技术,筛选与人卵巢癌A2780细胞特异性亲和的短肽,以及研究短肽对卵巢癌细胞的抑制作用。有望为卵巢癌靶向药物的研究开辟新的道路。方法:构建裸鼠卵巢癌模型,尾静脉注射噬菌体文库于裸鼠体内,经过3轮体内淘选,得到高亲和力噬菌体,并测定、比较在肿瘤、心脏、肝脏和脑组织中的噬菌体效价。利用免疫组化方法,对各组织噬菌体的结合情况进行鉴定。同时随机挑取10个第3轮淘选后的噬菌体单克隆,ELISA试验对目标噬菌体进行亲和力检测。提取高亲和力噬菌体DNA,测定出短肽序列,并进行生物信息学分析。合成此短肽,用MTT法检测其对卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用。结果:裸鼠卵巢癌模型构建成功,3轮体内筛选后比较回收的噬菌体效价,肿瘤组织结合噬菌体为肝脏组织3.4×103倍,脑组织1.4×106倍,心脏组织1.3×106倍。免疫组化结果显示:肿瘤组织为阳性,肝脏为弱阳性,心脏及脑组织为阴性,说明结合的噬菌体在肿瘤组织富集。实验10个单克隆P/N>2.1,其中8个大于3.0,说明此10个阳性克隆均具有ELISA亲和力,8个具有高亲和力,测得此条与噬菌体特异性结合的短肽为PHLATLF。合成短肽,MTT法结果显示:特异性结合短肽对卵巢癌A2780细胞具有生长抑制作用,且与药物浓度及作用时间相关。结论:利用噬菌体体内展示技术和免疫组化、ELISA方法,成功筛选与鉴定出与人卵巢癌A2780细胞特异性亲和的短肽PHLATLF,为进一步将其与化疗药物偶联,研制出新的抗卵巢癌靶向药物打下基础。
其他文献
本文研究对象是功臣号,主要研究功臣号从唐前期特殊情况下授予到唐末频繁授予的历史过程中,功臣号是如何渐渐演进以至于宋代时有了制度规定。文章以功臣号发展时间为序,对有
信息化教学设计是信息化教学过程的关键环节,本文以旅游景观文化单元为例,从学习内容与教学要素、学情分析、设计理念、教学过程与评价、创新点总结等方面阐述了《中国旅游文
要实现我国行政管理体制改革的目标,提升和加强政府能力,必须开展政府绩效管理。我国政府近几年来对此已进行了大量的探索。从目前政府绩效管理的现状来看,尽管在理论和实践方面
探索山地建筑与自然环境的结合点,遵循因地制宜、节约资源、保护环境的原则。以地域文化与现代技术相结合,创造高低起伏、具有地域特色的建筑与生态环境的有机统一。
目的检测并分析肾癌(透明细胞癌)组织中HDAC7mRNA和蛋白的表达差异,并探讨蛋白表达水平与肾癌的发生、发展和患者预后彼此间的联系。方法对60例肾癌组织及20例正常肾组织中HDAC7
1.国际市场1.1基本面利好支撑硅铁价格持续走高2006年以来国际市场硅铁价格开始持续回升,5、6月份的涨势尤为明显,7月份硅铁价格开始趋于平稳。其中,6月份美国市场进口硅铁价
期刊
<正>湖南一力实业有限公司转轨变型记略一力物流园是由湖南一力实业有限公司全资开发的综合性大型物流平台。园区立项筹建以来,引起了各级政府的高度重视,不仅被确立为省、市
会议
提出一种基于HMM的人工情感模型。该模型将人类的情感过程视为两层随机过程,通过调整模型的初始参数,能够构建具有不同性格特征的心理模型;同时它作为情感引擎,能以概率的形式预
大凡伟大的小说家都能抓住人物性格和心理描写这个“关键”。托尔斯泰作为心理描写大师已为举世公认。我国伟大作家茅盾从他的处女作《蚀》问世起,就以其长于心理描写的特色为