人参化学成分及抗疲劳生物活性研究

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人参是传统的名贵药材,本文筛选人参皂苷的超声提取方法,优化人参中主要活性成分人参皂苷和人参多糖的联合提取方法,以及用先进的分析手段对人参不及其炮制品进行分析,通过以上对其成分的分析,再对人参和其炮制品的抗疲劳生物活性进行系统研究,实验的最后部分研究人参与五味子配伍后对五味子活性成分的影响变化,为更好利用人参资源提供科学依据。首先我们通过正交试验,研究超声法提取人参皂苷的最佳方法,找出适合小剂量,快速提取人参皂苷样品的方法为以8倍量60 %甲醇为提取剂30min提取4次的人参总皂苷提取率最高,为更好的利用人参资源提供基础,又研究了人参中联合提取人参皂苷和人参多糖的最佳提取工艺。通过正交试验,以酶标仪分光光度法测定人参皂苷和多糖的含量为指标,筛选提取人参皂苷和多糖的最佳提取工艺。结果显示最佳提取工艺为用95%甲醇、固液比为1:5提2次获得总皂苷;再将其残渣用10倍量水提取人参多糖。该工艺方法合理,人参皂苷和多糖的联合提取效率均较高,用此法能够充分利用宝贵的人参资源,为工业化生产提供理论依据。文章的第二部分,我们研究了人参与五味子配伍对五味子活性成分的影响,建立高分离快速液相色谱(RRLC)测定五味子中主要活性成分五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量的方法。结果显示五味子与人参配伍比例对共煎液的pH值有显著影响,五味子单独煎煮和加入不同量的人参共同煎煮,五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量随着人参加入量的增加而降低,当五味子与人参比例为6:3时五味子甲素、五味子乙素含量变化比较显著。RRLC-Q-TOF MS分析在人参与五味子配伍比例为3:6,pH值为3.52的条件下,人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1、Re发生水解,主要转化为一些次级皂苷20 (S)-Rg2、20-(R)-Rg2、F2、20- (S)-Rg3、20-( R)-Rg3;Rg6、Rg4、Rk1、Rg5;Rk3、Rh4,为临床合理配伍应用提供一定的化学物质基础。在第三部分,我们采用高分离度快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)联用技术对人参和红参中的人参皂苷类成分进行了分析研究。通过化合物的保留时间、精确分子量信息及同位素分布、串联质谱碎片信息鉴定分析了相应皂苷类化合物。建立了人参药材和红参的RRLC-Q-TOF MS快速、准确的分析方法。通过前述实验我们发现,人参及其炮制品活性成分有很大差别,针对其差别我们研究了人参及其炮制品在抗疲劳中的作用。将小鼠随机分组,连续给药15d,负重游泳后,检测肝糖元、肌糖元、血尿素氮、血乳酸含量、过氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶六种与疲劳作用相关的生物化学指标。结果显示实验组与对照组相比,人参组小鼠肝糖元、肌糖元含量高;血尿素氮、血乳酸含量降低。红参组小鼠肝糖元、过氧化物歧化酶含量高,血乳酸、血尿素氮含量降低。高压红参组小鼠肝糖元含量高,血乳酸含量低。所以实验结果显示人参和两种炮制品均具有抗疲劳作用,其中以人参效果最为显著,这为开发人参功能性食品和药物提供了理论依据。
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