甘青青兰黄酮活性部位的制备及其化学表征

来源 :青海师范大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yanfeng_wang
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甘青青兰系唇形科青兰属草本植物,是一种传统藏药,在民间用于治疗肝炎、胃炎、胃溃疡和出血等疾病症状,广泛分布于我国西藏、青海、四川以及甘肃等省区。本论文以甘青青兰黄酮活性部位作为研究对象,采用比色法筛选总黄酮含量测定方法;在单因素实验的基础上采用Box-Behnken响应面法对总黄酮提取工艺进行优化;通过大孔树脂吸附法对总黄酮纯化工艺进行优化;在制备工艺的基础上,采用UPLC-Q-TOF/MS法对总黄酮活性部位的化学成分进行鉴定;采用DPPH法对黄酮活性部位进行活性评价。主要研究结果如下:(1)对比研究紫外直接测定法和HCl-Mg粉显色法,优选HCl-Mg粉作为甘青青兰总黄酮含量测定的方法。(2)响应面法优化超声提取甘青青兰总黄酮的工艺为:料液比1:25g/mL、乙醇浓度58%、提取温度48℃、提取时间12min。在此条件下,甘青青兰总黄酮活性部位的得率为14.4%,验证实验表明,该工艺稳定可行。(3)从7种不同型号的大孔树脂中筛选出HPD826作为吸附树脂,优化后的纯化工艺为:上样液浓度1.7mg/mL、上样流速2mL/min、树脂床径高比1:9、上样35mL、以120mL55%乙醇为洗脱剂、洗脱流速1mL/min,在此条件下黄酮活性部位的含量可达87%。(4)采用UPLC-Q-TOF/MS法从甘青青兰总黄酮活性部位鉴定出11种化合物,其中有8个是黄酮类化合物,并且苜蓿素-7-O-葡萄糖苷是首次从甘青青兰中鉴别到的。(5)甘青青兰总黄酮活性部位对2,2-二苯基苦味酰基苯肼基(DPPH)自由基的清除作用与对照品Vc相差不大,因此甘青青兰黄酮活性部位有着一定的抗氧化活性。
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