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目的:探讨日本血吸虫复合疫苗诱导的保护性免疫研究.方法:1.用表达的融合蛋白rSjGST-Sj32和GMCSF-SjFer联合免疫小鼠,观察诱导产生的减虫及减卵效果.2.以SIEA的免疫兔血清筛选噬菌体12肽库,按"吸附-洗脱-扩增"的过程进行3轮免疫学筛选.将获得的SIEA抗原表位和重组铁蛋白联合或单独免疫小鼠,观察其免疫保护性.3.构建pc-Sj31-mIL-4和pc-Sj31-mIFN-γ真核表达重组质粒.采用间接免疫荧光技术显示重组质粒目的基因在小鼠肌肉细胞的表达,并观察小鼠免疫效果.结果:1.rSjGST-Sj32和GMCSF-SjFer联合免疫组与FCA对照组相比,获得了36.53％的减虫率和68.46％的每雌成虫肝卵减少率;单独rSjGST-Sj32或GMCSF-SjFer免疫组所诱导的减虫率及每雌成虫肝卵减少率均显著低于联合免疫组.2.随机12肽库经3轮筛选,特异性噬菌体富集了200多倍;结果显示,与对照组相比,联合免疫组获得了34.69％的减虫率和65.23％的肝卵减少率;联合免疫组均显著高于单独SIEA抗原表位组或单独铁蛋白免疫组.3.pc-Sj31-mIL-4和pc-Sj31-mIFN-γ重组质粒DNA中的目的基因均在细胞中表达;与空质粒对照组(A组)比较,pc-Sj31-mIL-4减虫率和减卵率分别为38.98％和65.90％,与pc-Sj31 DNA疫苗组相比,减虫率差异有显著性(P<0.05),而减卵率差异无显著性;pc-Sj31-mIFN-γ疫组的减虫率和肝组织减卵率分别为28.56％和60.20％,但表达鼠mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗并未明显优于单纯表达日本血吸虫组织蛋白酶B(Sj31)DNA疫苗的免疫保护作用.结论:1.rSjGST-Sj32和GMCSF-SjFer蛋白联合免疫可显著地提高这两种蛋白单独应用时的免疫保护作用.2.日本血吸虫未成熟虫卵抗原表位和重组铁蛋白联合免疫的效果优于单独应用SIEA表位疫苗或铁蛋白疫苗免疫.3.首次成功构建了pc-Sj31-mIL-4和pc-Sj31-mIFN-γ真核表达重组质粒.经动物试验测试,IL-4作为DNA疫苗佐剂具有一定的增强pc-Sj31 DNA疫苗保护效果作用;mIFN-γ作为细胞因子佐剂在此研究中免疫增强作用不明显.