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黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是主要由黄曲霉和寄生曲霉产生的二氢呋喃香豆素衍生物。AFB1在粮食谷物、坚果、水果及香料中污染广泛,对人和动物具有强烈的肝毒性、致癌性、致突变、免疫抑制及生长抑制作用。AFB1是目前污染范围最广,危害性最高的霉菌毒素。在关于AFB1的降解研究中,微生物降解法依靠其特异性强、对环境友好、作用条件温和的优点,成为目前降解领域的研究热点。本论文筛选出一株可以高效降解AFB1的微生物菌株,研究了此菌株对AFB1的降解条件,并初步研究了降解机理,最后进行了应用实验。本论文的研究内容和结果如下:(1)AFB1降解菌的筛选及降解条件的研究:通过菌株与AFB1共培养的方法,从菌种库里筛选到一株可以高效降解AFB1的浑浊红球菌PD630菌株,72 h后对AFB1的降解率高达93.04%。PD630菌株对AFB1的主要产生菌即黄曲霉和寄生曲霉无抑制作用。AFB1对菌株生长无抑制作用。菌株的降解活性与培养基中AFB1浓度密切相关,在0-2μg/m L的污染范围内均可以保持高降解活性(>66%)。培养基中以葡萄糖和甘露醇作为碳源,胰蛋白胨和尿素作为氮源均可提高AFB1降解活性。PD630菌株经过AFB1诱导活化后,降解效率显著提升,降解所需时间由48 h缩短到24 h。(2)浑浊红球菌PD630降解AFB1机理的初步研究:PD630菌株胞外上清液对AFB1的降解活性显著高于菌细胞及胞内裂解液(P<0.05)。通过蛋白酶k、加热等处理后降解活性的变化,分析出胞外上清液的活性成分为热稳定酶。70%饱和度硫酸铵沉淀出的胞外粗酶液降解活性最高,降解率为55.01%。胞外粗酶液在p H值7-10、温度10-80℃的范围内均可保持对AFB1的高降解活性。Li+、Cu2+是酶的主要激活剂。通过TLC、HPLC发现AFB1实现全部降解且荧光性消失,但通过LC-MS未发现已报道的降解产物及降解途径。(3)浑浊红球菌PD630降解AFB1的应用研究:在玉米、小麦、花生三种污染基质中,固态发酵72 h后可显著降低AFB1含量(P<0.05),降解率分别为64.17%、67.66%、56.45%。当玉米和小麦中的料液比为1:1,花生中的料液比为1:1.4时,对AFB1的降解活性最高。PD630菌株接种量为20%时,玉米、小麦、花生中的AFB1降解率达到最大值。温度对三种基质中的AFB1降解活性影响较小,在20℃-40℃的发酵温度下均可以维持稳定的降解活性。PD630菌株除可以降解AFB1外,在NB培养基及玉米中对ZEN的降解率分别为55.65%及40.12%。而对DON的降解活性则较低,在NB培养基及玉米中的降解率分别为22.49%和18.44%。通过以上研究,筛选出一株可以高效降解AFB1的微生物菌株。建立了菌株在污染培养基及谷物中提高AFB1降解率的方法,得到了起降解作用的热稳定性胞外粗酶液。为高效降解AFB1提供了新菌种资源,也为在食品及饲料中消除AFB1污染提供新方法。