急性心肌梗塞(AMI)后整个左心室(包括梗塞区和非梗塞区)心肌结构和形态发生的一系列改变称为心室重构(VR)，包括早期的梗塞区伸展和晚期的整体心室扩张两方面。据统计在有Q波AMI中VR的发生率为30-50％。心室重构不仅使心肌梗塞患者左室功能严重受损，并发症增多，而且死亡率亦明显增加，因此抗心室重构已成为当前心血管领域中最为重要的研究内容之一。 在对VR的发生机理的研究中指出，RAAS的激活具有重要的意义，而其中AngⅡ是重要的介体之一。现代医学认为通过挽救濒死心肌和减轻心室负荷来限制VR是有效的。 AMI属中医的“胸痹心痛”、“真心痛”范畴，国内许多医家对其病因病机、治法方药、动物实验等作了许多研究，取得了较好的疗效。中医药在防治AMI上取得的成绩，也为其防治AMI后VR奠定了基础。本文通过总结导师陈镜合教授多年的临床实践，认为正气亏虚是心室重构的病理基础，气滞、血瘀、痰阻是导致心室重构的主要病因，本虚标实，虚实错杂是VR的病理机制。开心胶囊是导师陈镜合教授经验方，具有益气养阴、活血化瘀、化痰散结的功效，既往的实验中显示开心胶囊可对抗冠脉结扎大鼠引起的心室重构。因此本研究目的是验证它的临床疗效和对晚期心肌肥大的影响。 一．临床研究 AMI后VR的病理生理研究表明：VR过程常伴有神经内分泌因子的过度激活，如AngⅡ、ET、ALD、ANP等因子的过度释放，这些因子之间相互作用，进一步加剧心功能的恶化，而导致心衰的发生。因此治疗AMI后VR，延缓心力衰竭的进展，可从干预神经内分泌因子的过度释放入手。临床实验分为以下几部分： 1．彩色多普勒：本课题选择42例AMI患者，治疗后3周行彩色多普勒检查，同时选择30例正常人作对照，结果发现：AMI组LNEd、LVEDV、LVESV较正常组升高，而EF值较正常组下降，证实AMI患者存在不同程度的心室重构情况。 2．AngⅡ和ALD：RAAS激活在AMI后VR中起重要作用，作为RAAS的二个效应分子-AngⅡ和ALD，其兴奋程度与AMI后心功能程度密切相关。结果显示：治疗前血浆AngⅡ、ALD水平均升高，分别为134.08±48.70 pg/ml和132.68±76.65pg/ml，而治疗后较前下降，但经统计学处理后无统计学意义。 3．ET：内皮素是促使心室重构的介体之一。结果显示：治疗前血浆ET为86.06广州中匣大学似士学位论文 研臾生：赵镣 导师：除锭合狄投士24·38 Pg／ml，而治疗后为 55．33士13．67 pg／ml，与治疗前相比具有统计学意义。4．删P：心钠素作为体内＊ng J卜＊T的拈抗剂，在＊＊1后＊R中起非常重要的作用。结果：治疗前 172 ＊6土58．33 pg／Inl，治疗后 129．51土44．59 pg／ml，与治疗前相比具有统计学意义。二．实验研究 分子医学研究表明：心肌细胞是始动VR的基础，心肌梗塞后存活的心肌细胞接受了心肌缺血、坏死的信息，并传递给细胞核，经细胞核反应，于是产生了一系列如心肌细胞肥大等细胞基因和表型改变，从而导致心室重构的发生。因而从细胞分于水平来研究心室重构是揭示。D室重构发生机制的关键。 （一）新生大鼠心肌细胞的培养与鉴定 选用出生1。3天SD乳鼠，用酶消化法分离心肌细胞，心肌细胞经差速粘附后置于37C、5％COZ培养箱中单层贴壁培养。用倒置相差显微镜观察心肌细胞，再以免疫细胞化学法鉴定，结果显示心肌细胞培养至2448小时，在倒置相差显微镜下可观察到心肌细胞开始贴壁生长，初为圆形，后为梭形，单个细胞开始搏动，搏动频率多数在20上 次／分，在培养至第六、七天时可形成单层或细胞簇，呈放射状排列的同心圆形，并出现同步性搏动，此时心肌细胞收缩明显有力，搏动频率多在 100次／分左右。 心肌细胞免疫细胞化学：用。－sarcomeric－actin进行免疫细胞化学染色，可见心肌细胞胞浆被染为棕色，呈阳性反应。证实为心肌细胞。（二）开心胶囊含药血清对 AAng＊诱导的心肌细胞肥大的影响1．含药血清的制备：选SD大鼠32只，按体表面积折算后，予开心胶囊、开搏通、及蒸馏水灌胃后，腹主动脉取血，离心。水浴灭活、过滤除菌后制成含药血清。2．心肌细胞蛋白质含量的测定：心肌细胞分离后，以2’10’／毫升接种于24孔培养板内培养至第三天，培养液改为无血清培养液，再培养24小时后改为不同时间含药血清，再继续培养 5天，用 Aug 11诱导心肌细胞肥大，用紫外分光光度计测定不同组别蛋白质的含量。结果表明：Aug 11组心肌细胞蛋白质含量最高，与正常组相比，有统计学意义。而用不同剂量及不同时间取血的开心胶囊含药血清预先处理心肌细胞后，再用 Aug 11刺激肥大，心肌细胞蛋白质含量有不同程度的下降，尤其以H3组效果明显。证实开心胶囊有抑制心肌细胞肥大的作用。 （三）开心胶囊含药血清对 AAng 11诱导的心肌细胞 c－fos表达的影响 心肌细胞以2勺0‘／毫升接种于6孔培养板内，待培养至第7天（具体分组情况如实验二人 给予 Aug 11刺激 30分钟后，用 TRlzol试剂盒提取心肌细胞总 RNA。用RNA／DNA纯度检测仪测定其浓度和纯度，OD260；280比?