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目的:三叶因子家族在损伤后的黏膜修复与重建过程中有重要的作用。TFF3除了在胃肠上皮以部位特异性方式表达外,下丘脑和垂体也有TFF3表达。通过对实验性胃溃疡大鼠脑垂体TFF3在垂体各部的分布和数量改变以及血清TFF3含量的检测,探讨脑垂体TFF3在溃疡形成和愈合过程中可能的神经内分泌调节机理,为脑垂体TFF3在溃疡自愈过程中的作用提供依据。
方法:采用冰乙酸复制大鼠实验性胃溃疡模型,实验分为:实验性胃溃疡组(溃疡组)、盐水对照组(盐水组),正常组。溃疡组和盐水组分别于造模后1、2、4、6、10、14、23天取材,以免疫组织化学染色检测溃疡组和盐水组垂体神经部、中间部、腺垂体TFF3的表达定位及变化；RT-PCR检测垂体TFF3 mRNA的转录情况；用酶联免疫吸附实验检测血清TFF3含量变化。
结果:
1.成功获得大鼠胃溃疡模型,造模稳定成功率高。
2.免疫组织化学染色及图像分析结果:
2.1垂体神经部TFF3免疫反应阳性物质主要存在于Iterring body内,呈棕黄至深棕色,神经纤维也有阳性信号出现。溃疡术后1d组神经垂体Herring body阳性略有增加,术后2d组开始增高(P<0.01),术后4d组阳性略有降低,6d复增高,之后随溃疡术后时间的延长表达呈渐增趋势,至溃疡术后14d TFF3平均光密度达到高峰,至23d有所下降,仍维持于较高水平(P<0.01)。
2.2腺垂体部TFF3免疫反应阳性物质存在于腺垂体一些细胞胞质内,呈棕黄至深棕色,经邻片PAS染色共定位发现:TFF3阳性产物存在于嗜碱性细胞内,且主要分布于血窦周边。溃疡组与盐水组相比:溃疡第1、2d组,腺垂体内阳性信号明显增强；4d～10d组阳性细胞数量逐渐增多,且着色深,14d～23d组阳性细胞数量逐渐降低,免疫反应减弱,但仍高于正常细。
3.RT-PCR检测TFF3mRNA的转录情况
神经垂体各组均未检测到TFF3mRNA的转录,腺垂体各组均检测到TFF3mRNA转录,溃疡组TFF3/GAPDH光密度比值在溃疡2～23d均高于正常组(P<0.01,或P<0.05)
4.放射免疫分析检测:血清TFF3在溃疡1d～6d逐渐增多,10～23d有所下降,但仍高于正常组(P<0.01)。
结论:
1.神经垂体TFF3:Herring body和神经纤维呈免疫反应阳性,未见阳性细胞,推测神经垂体TFF3是由下丘脑合成,沿轴突输送而来。溃疡期间神经垂体TFF3发生了改变。
2.腺垂体TFF3:腺垂体嗜碱性细胞能够合成TFF3,阳性细胞临近血窦。溃疡期间腺垂体TFF3高表达。
3.血清TFF3:溃疡组血清TFF3浓度明显高于正常对照组。
4.垂体TFF3在溃疡期间发生了改变,且主要通过释放入血发挥促进溃疡愈合的作用。