水溶性Mn、Ru羰基CORMs及Mn-CORMs@纳米马达的合成、CO缓释与生物活性研究

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CO作为一种重要细胞信号分子,由于其可以多方面调节细胞功能以及肿瘤微环境等,使得生物体内CO释放分子(CORMs)在过去的几十年中,受到了广泛的关注。微纳米马达作为一种新型载体,因其能够在有燃料或者无燃料的情况下,承担将货物从一端运送到另一端的艰巨任务,例如以超越布朗运动的速度,自我推进并钻入细胞环境,在生物传感、细胞操作、药物递送等生物医药领域具有巨大的应用前景。过渡金属羰基化合物由于含有多个-CO基团,具有一定的稳定性,可局部用药提供CO,有着用药时机、用量大小和释放速度容易控制等优点常被用于CORMs研究。而氨基酸作为蛋白质的构件分子,具有良好的生物相容性。基于此,本文通过向Mn、Ru羰基配合物中引入小分子氨基酸配体,制备了系列具有水溶性的Mn、Ru羰基CORMs,并与微纳米马达相结合,探究了CORMs@纳米马达复合体系的CO缓释与生物活性。主要工作如下:首先选取D-谷氨酸(L1)、D-天冬氨酸(L2)、L-丝氨酸(L3)、L-高丝氨酸(L4)为配体分别与五羰基溴化锰和六羰基氯化钌反应,合成了8种Mn、Ru羰基配合物MnL1、MnL2、MnL3、MnL4、RuL1、RuL2、RuL3、RuL4。通过傅里叶红外光谱、核磁共振氢谱、紫外-可见吸收光谱对配合物进行结构表征。水溶性实验表明所得均具有较好的水溶性。利用肌红蛋白实验使用365 nm紫外光、465 nm蓝光、520 nm绿光间隔照射,通过紫外-可见吸收光谱研究了上述配合物的CO缓释性质,结果表明8种水溶性CORMs都能表现出较好的CO释放性质,其中MnL3在蓝光下,释放出最多的CO为55.02μM、半衰期为2025 s。其次利用MTT法考察了Mn羰基配合物的生物相容性,结果显示在120μM时MnL2显示出相对较好的癌细胞抑制率。最后制备了两种不同的纳米马达Pt-HSiO2马达和Au-UCNPs@SiO2马达,通过扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、粒径分析仪表征其结构,并分别选用Mn-L1、Mn-L2两个CORMs负载到制备的马达上,通过MTT法检测了负载CORM马达的生物相容性。研究发现,过氧化氢驱动的Pt-HSiO2马达在1.5%的过氧化氢下,可以9.085μm·s-1的速度运动,光热驱动的Au-UCNPs@SiO2马达可以7.355μm·s-1的速度运动。CORM@Pt-HSiO2、CORM@Au-UCNPs@SiO2比CORM@SiO2、CORM@UCNPs@SiO2均显示出优秀的癌细胞杀伤效果,原因可能是纳米马达的引入提高了CO在癌细胞内的分布范围。
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